HPV分型试剂盒及市场各产品比较.docVIP

HPV分型试剂盒 HPV目前市场上主要产品： 杂交法（达安19、凯普21、亚能23、透景26）；实时荧光PCR（之江13种高危分型、港龙凯普亚能13种高危不分型、达安8个型定量）；第二代杂交捕获法（HC2）等 2、操作方法： 200ul标本①HPV所有厂家标本处理操作流程（包括之江生物，都大同小异）： 200ul标本 12000 12000rpm离心5min 沉淀加1ml生理盐水混匀 沉淀加1ml生理盐水混匀 12000 12000rpm离心5min 沉淀加100ul核酸提取液混匀 沉淀加100ul核酸提取液混匀 100 100℃ 12000 12000rpm离心5min PCR试剂配制 PCR试剂配制 点样上PCR仪扩增 点样上PCR仪扩增 ②HPV实验： A、杂交法：首先加样上PCR仪做扩增，上机时间大约一个半小时左右。PCR完成后做杂交，目前市场上有手工杂交和使用杂交仪杂交。操作时间2-4个小时。 B、第二代杂交捕获法（HC2）: 原理是利用对抗体捕获信号的放大和化学发光信号的检测 , C、荧光定量PCR：直接上机通过荧光信号累积实时监测整个PCR进程，之江生物是用多重PCR对标本进行准确的13个高危型的具体分型，其他不能具体分型。 举例之江产品： 之江八管双通道仪器(双色荧光PCR仪器都可以用)： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 B Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 C Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 D Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 E Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 Mix5 F Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 Mix6 G Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 Mix7 H Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 Mix8 一排八管做一个标本即可具体分型！ 结果判断： HPV核酸荧光PCR检测混合液 若FAM通道Ct值≤35，结果判断为 若VIC通道Ct值≤35，结果判断为 Mix1 16+56 HPV16 HPV56 Mix2 18+45 HPV18 HPV45 Mix3 35+59 HPV35 HPV59 Mix4 39+51 HPV39 HPV51 Mix5 58+52 HPV58 HPV52 Mix6 31 HPV31 Mix7 33 HPV33 Mix8 68 HPV68 ②四管四通道仪器（ABI7500、罗氏480、伯乐CFX96、SLAN96孔等四色荧光PCR仪器）： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 A Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 B Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 C Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 D Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 E Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 Mix1 F Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 Mix2 G Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 Mix3 H Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 Mix4 四管做一个标本即可具体分型！ 结果判断： HPV核酸荧光PCR检测混合液 若FAM通道Ct值≤35，结果判断为 若VIC通道Ct值≤35，结果判断为 若610通道Ct值≤35，结果判断为 若670通道Ct值≤35