结核病实验室诊断.PPTVIP

结核病分子生物学诊断 2015年6月，我科参加CTCTC“EasyNAT?结核分枝杆菌核酸检测试剂盒现场应用评估”项目,结果如下： 患者类型 例数 EasyNAT TB-DNA检测 阳性率 % 阳性 阴性 涂片阳性 7 7 0 100.0 涂片阴性 43 2 41 4.7 培养阳性 10 9 1* 90.0 培养阴性 40 0 40 0.0 注*：1例培养阳性最终鉴定为非结核分枝杆菌 结核病分子生物学诊断 四、Gen-Xpert MTB/RIF 进行标本处理、实时PCR和利福平耐药性检测的完整平台 痰标本可以直接放入模块中，而无需与任何试剂进行混合处理 GeneXpert 设备可进行标本液化、去污染、富集、DNA提取、 rpoB实时扩增、应用分子灯塔检测耐药相关的突变 容易使用，不需要进行分子生物学培训 操作完全自动化， 使用起来既容易又安全。 结核病分子生物学诊断 Xpert MTB/RIF与PCR TB-DNA检测的比较： 阳性符合率＝99.03％，阴性符合率＝92.61％，总符合率＝95.31％ Gen-Xpert PCR TB-DNA 合计 阳性 阴性 阳 性 204 21 225 阴 性 2 263 265 合 计 206 284 490 结核病分子生物学诊断 涂片阳性肺结核: Xpert 检出率=99.35％ 涂片阴性肺结核: Xpert 检出率=35.32％ Gen-Xpert 涂片结果 合计 阳性 阴性 阳 性 152 71 223 阴 性 1 130 131 合 计 153 201 354 结核病分子生物学诊断 Xpert MTB/RIF与BD960液体培养比较实验： 阳性符合率＝95.52％，阴性符合率＝95.51％，总符合率= 95.51％ Gen-Xpert 培养+鉴定结果 合计 阳性 阴性 阳性 213 12 225 阴性 10 255 265 合计 223 267 490 结核病分子生物学诊断 Xpert MTB/RIF与比例法药敏比较实验： 阳性符合率 ＝96.88％，阴性符合率 ＝95.53％，总符合率 ＝95.73％， Gen-Xpert 利福平药敏试验 合计 耐药（阳性） 敏感（阴性） 耐药（阳性） 31 8 39 不确定 0 2 2 敏感（阴性） 1 171 172 合计 32 179 211 结核病分子生物学诊断 WHO关于Xpert MTB/RIF的建议 Xpert MTB/RIF 应该用于MDR-TB的高危人群、以便尽早发现MDR-TB患者，有效控制疫情。 Xpert MTB/RIF 在MDR或HIV问题不十分严重的地区，可以考虑作为显微镜检查基础之上的后续检测，特别是用于涂阴标本的进一步检测。 体外r-干扰素释放试验 蛋白质水平 结核菌素试验（TST） T-SPOT.TB QuantiFERON-TB Gold in-tube (QFT-GI) 潜伏性结核（LTBI） 体外r-干扰素释放试验 γ 干扰素 检测阴性 γ干扰素 检测阳性 TB抗原多肽 T细胞 活化T细胞 γ 干扰素 结核病实验室诊断 1. 结核病背景资料 2. 结核病常规检验 3. 结核病实验室诊断 4.体外r-干扰素释放试验 5.小 结 背景—结核病流行现状 全球有三分之一人口（20亿）感染了结核杆菌 我国现患肺结核病人达500万，占全球病人总数的1/4 背景—结核病感染、传播、发病过程 潜伏感染染 肺病或其他疾病 潜伏感染 复发 细菌在人体复制 播散Disseminates 发作Onset 康复Recovery 时间表Time 诊断Diagnosis 治疗Treatment 痊愈 ≥ 2 个月（months） 背景—当前结核病的研究 新型抗结核药物(50%) 新型快速诊断技术(40%) 新型结核疫苗(10%) JID 2012:205 (Suppl 2), S147. 背景—结核分枝杆菌基础 结核分枝杆菌（M. tuberculosis）简称为结核杆菌（tubercle bacilli）。早在1882年，德国细菌学家柯赫（Robert Koch）就已证明结核分枝杆菌是结核病的病原菌。本菌可侵犯全身各组织器官，但以肺部感染最多见。 在微生物分类中，结核分枝杆菌属于放线菌门、放线菌纲、放线菌目、分枝杆菌科、分枝杆菌属 分枝杆菌复合群共包括人型、牛型、非洲型和田鼠型，而人型结核分枝杆菌是人类主要的致病菌 背景—结核分枝杆菌基础 （1）结核杆菌可经多途径感染，由呼吸道、消化道和破损皮肤侵入机体，最常见为经呼吸道感染引起肺结核。 （2）结核杆菌无内毒素和外毒素，也不产生侵袭性酶