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基础自主梳理 一、试管动物技术 试管动物技术是指通过__________使卵子和精子在体外条件下成熟和_________,并通过培养发育为____________后,再经过_________产生后代的技术。 人工操作 受精 早期胚胎 移植 思考感悟 1.在试管动物技术中,移植前需要做什么? 【提示】 体外受精和早期胚胎培养。 二、体外受精的步骤 1.卵母细胞的采集和培养 分类 举例 采集卵母细胞的方法 实验 动物 小鼠、猪、兔、羊等 用_________________处理,使其排出更多的卵子,从____________中冲取卵子 大型 动物 牛 从屠宰母畜的卵巢中采集,也可以从活体动物的________中吸取 促性腺激素 输卵管 卵巢 采集的卵母细胞都要在体外经 _________________后,才能与_______的精子受精。 2.刚采集的卵母细胞要培养到什么阶段才能受精? 【提示】 减数第二次分裂中期。 2.精子的采集:收集精子的方法有假阴道法、手握法和电刺激法等。 人工培养成熟 获能 3.精子的获能 获能方法 概念 适用动物 培养法 将精子放入人工配制的_________中培养,使其获能 啮齿动物、家兔和猪等 化学诱 导法 将精子放在一定浓度的_______或钙离子载体A23187溶液中,用___________诱导精子获能 牛、羊等家畜 获能液 肝素 化学药物 4.受精:获能的精子和____________的卵子,一般可以在___________或专用的__________中完成受精过程。 三、胚胎的早期培养 1.培养液的成分:一般包括_________和有机盐、___________、激素、__________、核苷酸等营养成分以及血清等物质。 培养成熟 获能溶液 受精溶液 无机盐 维生素 氨基酸 2.胚胎移植的时间:不同动物胚胎移植的时间不同。牛、羊一般要培养到___________阶段或______阶段进行移植。人的体外受精胚胎,可在______________阶段移植。 桑椹胚 囊胚 8~16个细胞 核心要点突破 体外受精 体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等几个主要步骤。 1.卵母细胞的采集和培养 第一种方法:对实验动物如小鼠、兔和家畜猪、羊等卵母细胞采集时,可先用促性腺激素处理,使其排出更多的卵子,然后在适当的时间从输卵管中冲取卵子,并使其直接与获能的精子在体外受精。 第二种方法:从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞。 第三种方法:活体采卵。需借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等工具,直接从活体动物卵巢中吸取卵母细胞。 后两种方法适用于大家畜或大型动物。采集的卵母细胞需在体外培养成熟后才能与获能的精子受精。 2.精子获能的处理方法 在体外受精前,必须先对精子进行获能处理,方法有: (1)培养法:对于啮齿类动物、家兔和猪等动物,将取自附睾的精子,放入人工配制的获能液中,培养一段时间后,精子就可获能。 (2)化学诱导法:对于牛、羊等家畜,将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,用化学药物诱导精子获能。 3.受精 获能的精子和成熟后的卵子在体外合适的环境下共同培养一段时间,便可受精;受精后形成的受精卵需经早期发育培养,才能完成植入或着床。 过程概括如下: (2011年烟台市高二检测)采集的卵母细胞,都要在体外经人工培养成熟后,才能与获能的精子受精。以下原因不正确的是( ) A.卵子从输卵管中冲出也要经历类似精子获能的过程 B.动物排出的卵子成熟程度不同 C.体外人工培养至减数第二次分裂中期时,才算成熟 D.冲出的卵子还需要培养一段时间才能由小变大 例1 【尝试解答】 D 【解析】 冲出的卵子还不成熟,只有培养至减数第二次分裂中期时,才具有与精子受精的能力。在此之前,也要经历类似精子获能的处理。 【互动探究】 (1)精子获能的方法主要有哪些? (2)体外采集小鼠的卵子常用哪种方法? 【提示】 (1)培养法和化学诱导法。 (2)超数排卵处理法。 【探规寻律】 (1) 获取卵细胞的方法有:①小动物应用促性腺激素诱导超数排卵;②大家畜一般从屠宰场屠宰的母畜卵巢获得;③也可以借助内窥镜或腹腔镜直接从卵巢吸取。 (2)获取的卵细胞必须在体外培养到MⅡ中期。 (3)用于体外受精用的精子,必须在体外获能,并且受精过程必须在获能液中完成。 胚胎早期培养和生产试管牛的技术流程 1.培养液的成分及用途 (1)成分 两“盐”:无机盐和有机盐。 两“素”:维生素和激素。 两“酸”:氨基酸和核苷酸。 另有水、血清等。 (2)用途:当精子与卵子在体外受精后,用于受精卵的继续培养,以检查受精状况和受精卵的发育能力,当胚胎发育到适宜的阶段时,可将其取
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