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Hoechst 33342使用说明 货号：C0030 规格：10ml/50ml 保存：-20℃避光保存，一年有效。 产品简介： Hoechst 33342，也称 bisBenzimide H 33342 或 HOE 33342，是一种可以穿透细胞膜 的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。Hoechst33342 染色常用于细胞凋亡检测，染色后用 荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst33342 也常用于普通的细胞核染色，或常规的 DNA 染色。Hoechst 33342 的最大激发波长为 346nm，最大发射波长为 460nm； Hoechst 33342 和双链 DNA 结合后，最大激发波长为 350nm，最大发射波长为 461nm。本 Hoechst 33342 染色液为即用型，可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或 组织的细胞核染色。 使用说明： 1. 对于固定的细胞或组织： a. 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光 染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行 Hoechst 33342 染色。如果 不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33342 染色。 b. 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 Hoechst33342 染色液，覆盖住样品即可；对 于悬浮细胞，至少加入待染色样品 3 倍体积的染色液，混匀。室温放置 3-5 分钟。 c. 吸除 Hoechst33342 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分 钟。 d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋 亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。 2. 对于活细胞或组织： a. 加入适当量 Hoechst33342 染色液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔 板一个孔需加入 1ml染色液，对于 96 孔板一个孔需加入 100 微升染色液。 b. 在适宜于细胞培养的温度下培养 20-30 分钟。弃染色液，用 PBS 或培养液洗涤 2-3 次即可进行荧光检测。 注意事项： 1.荧光染料都存在淬灭的问题，为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。建议染 色后尽量当天完成检测，活细胞或组织染色后应立即观察。 2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。