脑脊液常规操作规.docVIP

常规分析项目 ZDFYJYK/SOP-A-02-2013 第1版 第0次修改 第 PAGE 1 页 共 NUMPAGES 1 页 检验目的 指导脑脊液（CSF)常规测定。 方法原理 2.1脑脊液是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体。由于脉络丛上皮细胞对血浆 中各种物质的选择性分泌和超滤作用，血浆中各种成分对血脑屏障的通透性各有不 同。其中最易通过血脑屏障的是氯、钠、镁离子及乙醇;其次为清蛋白、葡萄糖、钙 离子、乳酸、氨基酸、尿素和肌酐;纤维蛋白原、补体、抗体、某些药物、胆红素、 胆固醇则极难或不能通过。中枢神经系统任何部位发生器质性病变时，如感染、炎 症、肿瘤、外伤、水肿和阻塞等都可以引起脑脊液成分的改变。通过对脑脊液理学 检查，显微镜检查、化学和免疫学检查及脑脊液病原学检查，可对疾病的诊断、治 疗和预后判断提供依据。 2.2脑脊液（CSF）常规测定内容包括:颜色、性状、有核细胞计数、红细胞计数、潘 氏试验、细菌等。 2.3潘氏（pandys)试验：CSF中的球蛋白与苯酚结合，形成不溶性的蛋白盐而产生白 色混浊或沉淀。 1 颜色（COLOR) 6 中性粒细胞（NE) 2 透明度（clearity) 7 淋巴细胞（LY） 3 凝固性（coagulability） 8 单核细胞（MO） 4 脑脊液有核细胞计数（CSF—NUCL) 9 潘氏试验（pandys test） 5 脑脊液红细胞计数（CSF—RBC) 方法性能参数（如线性、检出限、测量区间、不确定度、准确性、精密度、灵敏度和特 4.标本类型 4.1标本类型：新鲜CSF。 4.2标本拒收条件：拒收延迟室温2h、冷藏6h未送达标本。 4.3标本保存与稳定性：一般室温1h内完成检验，久置可致细胞破坏，影响细胞计数 及分类检查。 5.要求的容器、防腐剂或添加物、仪器、试剂或分析系统 5.1标本容器：BD无促凝成分红头管或洁净干燥带盖玻璃管。 5.2试剂 5.2.1试剂组分： 生理盐水 0.9%Nacl溶液 白细胞稀释液 1%冰乙酸（1ml分析纯冰醋酸+蒸馏水至100ml) 刘氏快速瑞氏染色液 A液：曙红、甲醇 B液：亚甲蓝 潘氏试剂 10%苯酚溶液（纯苯酚10ml+蒸馏水至100ml） 5.2.2 试剂存储和有效期： 试剂名称 存储条件 有效期 开瓶有效期 位置 生理盐水 室温 1年 1年 存货柜/血常规室操作台 冰乙酸 室温 2年 1年 药品柜 1%乙酸 冷藏 1年 1年 试剂冰箱 10%苯酚溶液 室温 1年 1年 药品柜 刘氏快速瑞氏染色液 室温 2年 6个月 药品柜/染色操作台 5.3仪器：OLYMPUS光学显微镜，血细胞计数板。 6. 校准程序 （计量学溯源性） 不适用 7. 质量控制，控制品使用水平和频率，允许限的纠正措施 不适用 8. 程序步骤 8.1一般性状检查：轻轻混匀CSF，观察量、颜色、有无凝块和透明度（一般细胞数≥300 /μl个时或蛋白增加可产生混浊），并记录。 8.2显微镜检查 8.2.1细胞计数（无凝块标本） （1）清或微混标本：a) 混匀后直接冲入计数池，计数四角四大方格内细胞总 数（包括RBC，NUCL）。 b) 用白细胞稀释液作1：1稀释，计数有核细胞数 c) 红细胞数＝细胞总数－有核细胞数 （当白细胞数≥30个/μl时，在白细胞计数池中直接分类至少50个白细胞） （2）混浊及以上标本： 外观 稀释 样本量 稀释液/溶解剂 粉色/轻度混浊 1:20 20μl 380μl 红色/混浊 1:50 10μl 490μl 带血量极高/极度混浊 1:100 10μl 990μl a)稀释标本：于清洁试管中按上表进行稀释，用以计数细胞总数； b)溶解RBC：于清洁试管中按上表进行稀释，用以计数有核细胞数； c)冲池；计数 d)红细胞数=细胞总数－有核细胞数