药物中特殊杂质的查..pptVIP

实验二 药物中特殊杂质的检查 一、目的要求1.掌握本实验中药物特殊杂质的来源； 2.掌握特殊杂质检查的操作方法。 二、实验原理 特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。 1.阿司匹林中的游离水杨酸: --杂质来源：原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水解产生（贮存过程中水解） --检查原理：阿司匹林无游离酚羟基，不与高铁盐溶液作用，而水杨酸则可与之反应生成紫堇色，可检出1μg的游离水杨酸。 原理： 2.甾体激素中的有关物质： --来源 原料、中间体、异构体、降解产物 --特点 （1）可能存在多个甾体杂质 （2）结构类似 本实验中，氢化可的松中“其他甾体”（现版药典称“有关物质”）的检查采用TLC法。 3.盐酸普鲁卡因注射液中的对氨基苯甲酸： --杂质来源： 水解产生对氨基苯甲酸，进一步脱羧、氧化成有色杂质，使注射剂颜色变黄、疗效下降、毒性增加。 检查方法 ： TLC法 三、仪器与试药 阿司匹林原料药； 盐酸溶液（9→100）； 硫酸铁铵指示液； 水杨酸对照品； 冰醋酸；乙醇；甲醇； 硅胶G；硅胶H； 四氮唑蓝的甲醇溶液； 氢氧化钠溶液； 羧甲基纤维素钠水溶液； 二氯甲烷；乙醚； 盐酸普鲁卡因注射液； 对氨基苯甲酸对照品；苯；丙酮；对二甲氨基苯甲醛溶液等。 电子天平；纳氏比色管；薄层板；展开槽；干燥箱等。 四、实验内容 （一）阿司匹林肠溶衣中游离水杨酸的检查 检查: 取本品30片（0.025g/片），研细，用乙醇15ml分次研磨，并移入50ml量瓶中，充分振摇，用水稀释至刻度，摇匀，立即滤过，精密量取续滤液2ml，置50ml纳氏比色管中，用水稀释至50ml，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液3ml，摇匀，20秒钟内如显色，与对照液（精密量取0.01%水杨酸标准溶液4.5ml，加乙醇3ml，0.05%酒石酸溶液1ml，用水稀释至50ml，再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液3ml，摇匀）比较，不得更深（1.5%）。 （二）氢化可的松中有关物质的检查 1. 供试品溶液和对照品溶液的制备 取本品，加氯仿-甲醇（9:1）制成每1ml中含3.0mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取适量，加氯仿-甲醇（9:1）制成每1ml中含60mg的溶液，作为对照品溶液。 2. 检查 吸取上述两种溶液各5μl （毛细管高度约2.0cm）， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水（385：60：30：2）为展开剂，展开后，晾干，在105℃干燥10min，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立即检视。供试品溶液如显杂质斑点，不得多于3个，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 （三）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 检查 吸取上述两种溶液各10μl（毛细管高度约2.0cm），分别点于同一含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上。以苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4）为展开剂，展开后，晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2%对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加入冰醋酸5ml制成）喷雾显色，供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 TLC检查结果观察： 供 试 品 对 照 品 控制杂质斑点个数以控制杂质 种类； 供试品溶液所显杂质斑点不得 深于对照溶液的主斑点。 五、注意事项 1. 在阿司匹林中游离水杨酸的检查中，制备供试品溶液所用的比色管须经干燥后使用，且供试品须用乙醇溶解后才可加水稀释至刻度，否则供试品难以溶解。 2. 游离水杨酸检查时，供试品溶液要临用现配，避免阿司匹林水解造成的误差。 3. 进行水杨酸检查时，应在中性或弱酸性溶液（pH4~6）中进行。若在强酸性溶液中，生成的紫兰色配合物会分解褪色。 4. 点样时，宜分次点加，每次点加后，待其自然干燥或温热气流吹干；点样基线距底边2.0cm，样点一般为圆点，直径为2mm~4mm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜，一般约为1.5cm~2.0cm。 5. 展开前，薄层板需饱和3-5min。 6. 展开时，薄层板浸入展开剂的深度为距底边0.5cm~1.0cm（切勿将样点浸入展开剂中），密封室盖，待展开至10cm~15cm，取出，晾干，按规定方法检测。层析缸必须密闭，否则影响分离效果。实验完毕，展开剂应回收。 7. 碱性四氮唑蓝试液应临用新配，新鲜试剂应呈黄色，颜色变深后不宜使用。 8. 自身对照法仅限于杂质斑点与主成分斑点颜色相同或相近时使用。 *杂质检查完毕的实验内容-G板和H板的制备（每人做一个