细菌体内的氧化应激.pptx

细菌体内的氧化应激 汇报人：董山山 汇报内容 氧化应激的来由 氧化应激的危害 氧化应激防御机制 氧化应激的基因响应 机体蛋白质的氧化损伤及修复 氧化应激的来由 氧化应激的概念最早源于人类对衰老的认识。 1956年英国学者Harmna首次提出自由基衰老学说，该学说认为自由基(Free radical）攻击生命大分子造成组织细胞损伤，是引起机体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的重要起因。1990年美国衰老研究权威Sohal教授指出了自由基衰老学说的种种缺陷，并首先提出了氧化应激的概念。 氧化应激的来由 氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时，体内高活性分子如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS）和活性氮自由基（reactive nitrogen species,RNS）产生过多，氧化程度超出氧化物的清除，氧化系统和抗氧化系统失衡的状态。 ROS包括超氧阴离子（.O₂-）、羟自由基（.OH）和过氧化氢（H₂O₂）等；RNS包括一氧化氮（.NO）、二氧化氮（.NO₂）和过氧化亚硝酸盐（.ONOO-）等。 基于本人课题研究对象包括羟基对微生物的影响，因此下面只阐述ROS的作用。 氧化应激的危害 脂类的氧化 DNA的氧化 蛋白质的损伤 脂类的氧化: 氧化应激会造成自由基直接攻击细胞膜膜上多聚不饱和脂肪酸，从而导致膜性质的改变以及膜结合蛋白的紊乱，并且氧化产物含有高活性的醛类，进一步导致DNA和蛋白质的损伤 (Humpries KM et al., 1998) DNA的氧化： 活性基团会攻击碱基和糖部分，造成骨架单双链的断裂，引入外来碱基和糖基，交联其它分子，复制遭阻止 (Sies H et al., 1993; Sies H et al., 1992) 蛋白质的损伤： 蛋白质受攻击后，会造成蛋白质氨基酸侧链残基被氧化成硫醇基和羰基，蛋白质-蛋白质交联，多肽碎片 ，氨基酸氧化内收导致残基接近金属结合位点，从而造成膜和蛋白性质的改变 (Stadtman et al., 2004; Stadtman et al., 1990) Fig. 1 ROS的形成及脂类的氧化(Wang et al., 1996) 氧化应激防御机制 大气层中O2的出现促使了防御机制的发展 一级防御：使得O2衍生的基团保持在合理水平 二级防御：修复氧化损伤 氧化应激防御机制 一级防御存在两类抗氧化系统: 一类是酶抗氧化系统，特定酶可以降低活性氧的稳定态水平，包括超氧化物歧化酶(SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX）等； 另一类是非酶抗氧化系统，低分子量的抗氧化分子维持细胞内还原环境，包括NADPH和NADH，类胡萝卜素，维生素C，维生素E，谷胱甘肽（GSH）、微量元素铜、锌、硒（Se）等。 氧化应激防御机制 二级防御包括DNA修复系统、蛋白水解和脂类水解酶 (Demple B et al., 1994) DNA修复酶包括核酸内切酶IV，核酸外切酶III，两种酶都作用于双链DNA清理的DNA3’末端。 原核细胞含有催化剂能够直接修复一些共价修饰的蛋白质的一级结构，最常见的一种修饰是还原氧化的二硫键：(i) 硫氧还蛋白还原酶的电子通过黄素载体从NADPH转移到硫氧还蛋白，(ii) 谷氧还蛋白使用GSH作为电子供体能够减少二硫键，(iii) 蛋白质二硫键异构酶促进和不活跃蛋白底物的二硫键交换反应 氧化应激的基因响应 氧化应激的防御机制由两种转录激活因子调控： OxyR：调控对过氧化物的防御机制 SoxRS：调控对超氧化物的防御机制 氧化应激的基因响应 两种转录激活因子响应调控： SoxRS调节子至少含有十个基因，来编码包括Mn-SOD,核酸内切酶，葡萄糖6-磷酸脱氢酶，延胡索酸酶，顺乌头酸酶，铁氧还蛋白还原酶，反义RNA（主要影响膜外蛋白的表达） OxyR基因调控编码下列蛋白的基因：氢过氧化物酶，谷氧还蛋白，谷胱甘肽过氧化物酶，NADPH依赖性烷基过氧化物还原酶，保护性DNA结合蛋白 氧化应激的基因响应 Fig. 2 OxyR对氧化应激的响应 (Elisa C. et al., 2000) 机体蛋白质的氧化损伤及修复 Fig. 3 机体蛋白质的氧化损伤及修复平衡 (Zong, 2011) 谢谢！ 请老师同学们批评斧正！