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柑橘育种新技术综述 柑橘 常规 育种 方法 主要有 引种、芽变 育种 、杂交 育种 、实 生选 种和 诱变 育种 等。 柑橘 大多 数的 品种 具有多 胚性 (polyembryony) ，而 世界 消费 追求无 籽性 状。 因此，现在柑橘多数栽培品种存在不同程度的性器官败育。这 导致了柑橘品种选育中，芽变选种占了很大的比重，特别是脐橙和温州蜜柑，新品种的获得基本上都是靠芽变选种与实生选种途径。由 于引种简单易行，倍受柑橘育种家的青睐，引种也在柑橘品种 选育 当中 占了 很重要 的位 置。 20 世纪初，美 国开 展杂 交育种，随 后，世 界各国科研工作者也一直在进行柑橘杂交育种的工作，其亲本选择主要集中在单胚 性品种当中。而 诱变育种应用则相对较少。但 就以上几种柑橘育种方法而言，由于柑橘存在童期长、远缘不亲和、性器官败育等问题，再加上育种目标的不可确定性，使得以上几种育种方法难以满足现代经济社会柑橘产业品种发展的要求。如 何快速得到既定目标柑橘品种并很快应用于生产，已经成为柑橘育种学家亟待解决的问题。随着组织培养技术与生物技术的日益突破，柑橘育种技术得到了飞速发展，其中包括组织培养技术育种，体细胞杂交育种，遗传转化育种等。 1组织培养育种 果树 组织 培养 (Tissue Culture) 是指从 果树作 物上 取出 器官 、组织 、细 胞或 原生质体等材料，在无菌的条件下利用人工培养基对其进行培养，使之生存并维持其结构和功能的方法和技术。 1．1体细胞变异育种 种质材料在离体保存前后遗传相对稳定是离体保存的基本要求。但是，在实际保存过程中，植物的离体保存种质都存在一定比例变异，这些变异对种质资源保存是不利的，但对育种来讲其中一些变异可能是有利的。柑橘离体种质资源保存包括腋芽、茎尖、叶、根、单细胞、原生质体、愈伤组织等。所以可以利用离体材料再生达到育种目的。如张 俊娥等在柑橘愈伤组织再生过程中观测到一定数量变异。 1．2胚抢救育种 有别于其它作物，柑橘及其近缘属大多数种和品种的珠心胚现象，导致了杂交育种中合子胚的退化和败育严重。在柑橘育种的过程中，为了克服多胚性的干扰，可以利用胚的离体培养技术，进行离体胚的抢救。与此同时，多胚性柑橘品种杂种苗比率一般很低。对 多胚性强的品种来说，受精几乎完全退化，所以利用胚抢 救技术可以大大提高杂种苗比率。 柑橘的珠心胚具有和母体一样的遗传特性，利用珠心胚可以进行无病毒苗的繁殖。同时，珠心胚也存在无性分离的“ 芽变” ，通过实生苗的选种可以获得原品种的新生系或是更优良的品种，故珠心胚在柑橘育苗上具有很重要的意义。世 界柑橘育种如今向无籽方向发展，利用二倍体和四倍体进行杂交获得三倍体植株是最为有效的 途径 。但 是 2x 和 4x 进行 杂交 的过 程中 ，合 子胚 一般 是早期 败育 的， 因此 只有利用幼胚的培养技术，才可以达到三倍体育种的目的。 2体细胞杂交育种 体细胞杂交技术即原生质体融合技术。植物原生质体由于无细胞壁，不仅是进行细胞学、遗传学、病理学、生理学等基础研究的好材料，而且也是进行作物改良的理想材料。它可以在一定程度上克服常规育种的某些局限性，扩大植物变异范围。在 果树育种过程中，柑橘原生质体融合是最成功的，现在已经得到了 多个融合组合品种。但研究表明，融合杂种多难以直接成为商业接穗品种，但其作为砧木改良具有一定的潜力。近 年来，主要针对以下几个方面开展研究。 2．1砧木的抗性育种 现有砧木都因存在某一方面的缺陷而限制了应用范围，甚至因某些不足给柑橘产业造成毁灭性的灾害。柑橘原生质体融合策略之一就是将具有互补抗性的双亲融合在一起，以期得到抗性互补的体细胞杂种。柑桔生产大国巴西、美国和中国都制 定了 相应 的柑 橘育 种计划。 针对 酸橙 不耐 柑橘 衰退 病 (Citrus tristeza virus ，CTV)的缺 点， 美国 目前 已成功 地得 到了 抗 CTV 的酸 橙 +柠 檬和 酸橙 +枳橙 杂种 [2] 。 另外， 还得 到了 抗寒、耐盐 、抗柑 橘裂 皮病 (CEV) 以及 矮化 等优 良性 状 的四 倍体 体细 胞杂 种 ，这些杂种作为砧木评价正在进行中。来 檬是巴西柑橘产区的主要砧木，嫁接其上的接穗 品种 具有 早实 及品质 优良 的特 点， 但其易 感柑 橘枯 萎病 (Citrus blight disease) ， Mendes ． da 等 (2000)[4] 用兰普 (Rangpur) 来檬 与对 枯萎 病有 抗性 的 Caipira 甜橙和 印度 酸橘 融合 ，获 得了 具有抗 性的 体细 胞杂 种，成 为很 有潜 力的 候选砧 木。另外 ，柑橘 近缘 种是 一个 巨大 的抗性 资源 库， Guo 和 Deng(1998)[s] 成功 地得到