实验二-乙肝鉴定.pptxVIP

免疫学技术Immunological Techniques;一、背景知识Background knowledge;影响抗原抗体反应的因素Factors affecting the antigen-antibody reaction;抗体的制备Antibody production;单克隆抗体的制备Preparation of monoclonal antibodies;人源化抗体的合成Production of human or humanized antibodies;基于抗体的免疫检测技术The use of antibodies in immunoassays;血凝抑制检验The hemagglutination inhibition assay;可进行定量检测，不会引起病毒扩增;免疫印迹Western blot （Immunoblotting）;免疫沉淀Immunoprecipitation (IP) ;IP免??印记IP-Western Blotting;放射免疫技术Radioimmunoassay (RIA);免疫荧光技术Immunofluorescence techniques;酶联免疫技术的发展Development Of An Enzyme-Linked. Immunosorbent Assay (ELISA);间接法Indirect ELISA;夹心法Sandwich ELISA;竞争法Competitive ELISA;ELISA技术的应用Applications of ELISA;实验二 乙肝表面抗原检验Hepatitis B Surface Antigen (HBsAg) Assays;二、实验目的The purpose of this experiment;三、实验原理The experiments principles;四、实验步骤 The experimental method;2.具体步骤Procedure for the ELISA test （protocol）;（4）洗板：手工洗板，弃去反应板孔内的液体，在吸水纸上拍干；用洗涤液注满每孔静止5-10s,弃去孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干 （5）加显色剂：先加显色剂A，每孔0.05ml；再加显色剂B，每孔0.05ml；充分混匀，放置37 ℃避光孵育30min （6）终止反应：每孔加入终止液0.05ml，混匀 （7）测定：以空白孔调零，在终止后10分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)或肉眼观察颜色变化。 ;3.注意事项Assay precautions;五、结果分析The analysis and interpretation of experimental results;六、讨论与提高Discussion;2，举例说明在ELISA检验中，哪些步骤发生失误会导致检验结果呈假阳性;3，为什么科研上检测未知蛋白时多用间接法;请当堂完成实验报告Please submit laboratory report confirming presence of HBsAg