新新学案高三生物一轮复习专题55DNA和蛋白质技术课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段讲义新人教版选修.ppt

　 学生合作绘制知识网络 师生归纳必记答题术语 1.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3′端延伸DNA链，因此，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 2.PCR反应需要DNA模板、两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶等条件。 3.PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 师生归纳必记答题术语 4.PCR每次循环都包括变性、复性和延伸三步，对应的温度分别为95 ℃、55 ℃和72 ℃。 5.DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列。 6.PCR扩增DNA片段可以使目的片段呈指数增长。 * 服/务/教/师 免/费/馈/赠 返回菜单 新课标生物·选修1 生物技术实践 自主学习 · 基础知识 合作探究· 重难疑 点 使DNA聚合酶能够从 的3′端开始连接脱氧核苷酸 引物 催化合成DNA子链 DNA聚合酶 合成子链的原料 4种 . 打开DNA双链 解旋酶 提供DNA复制的 . DNA母链 在DNA复制中的作用 参与的组分 模板 脱氧核苷酸 引物 DNA拷贝 DNA 扩增DNA片段 体外 多聚酶链式反应 3′ 5′ 3′ 两条彼此分离的DNA链 降低 变性 双链 结构 DNA的双螺旋 80～100 ℃ 缓冲溶液 Taq_DNA聚合酶 脱氧核苷酸 模板链 DNA 配对 碱基互补 50 ℃左右 解聚 90 ℃以上 DNA聚合酶 脱氧核苷酸 72 ℃左右 260 nm 指数扩增 序列 DNA PCR反应 0.5 mL PCR反应的微量离心管 水浴锅 恒温水浴锅 DNA扩增 温度 手指轻轻弹击管的侧壁 枪头 －20 ℃ 酶 缓冲液 高压灭菌 外源DNA 分别从两条链的引物端开始，都是连续合成，控制温度72 ℃ 在引物基础上，一条链连续合成，另一条链不连续合成 合成子链 可以是RNA或单链DNA分子片段 一小段RNA 引物 加热至90 ℃以上时，双链全部解开，不需解旋酶 在解旋酶作用下，细胞提供能量，部分解开 解旋 不需ATP提供能量 ATP提供能量 能量 细胞外 细胞内 场所 不 同 点 PCR反应 体内DNA复制 ①需提供DNA复制的模板②四种脱氧核苷酸为原料 ③都需要一定的缓冲溶液 ④子链延伸的方向都是从5′端到3′端 相同点 高温(可变) 体内温和条件 温度 30多次 受生物体自身控制 循环次数 需要 不需要 Taq DNA 聚合酶 体外迅速扩增 边解旋边复制，半保留复制 特点 不 同 点 服/务/教/师 免/费/馈/赠 返回菜单 新课标生物·选修1 生物技术实践