双缩脲法试验一蛋白质含量测定.ppt

生化技术实验 生物实验中心 2009.10 实验一 蛋白质含量测定--双缩脲法 一、 目的 学习掌握双缩脲法测定蛋白质含量。 了解其它一些蛋白质定量方法。 (BCA法、folin-酚试剂法，即lowry法，紫外分光光度法,280nm） 实验一 蛋白质含量测定--双缩脲法 实验一 蛋白质含量测定--双缩脲法 三、仪器与实验试剂 1、实验仪器 试管10ml（×7）/ 2人 不同刻度吸管若干支。 实验一 蛋白质含量测定--双缩脲法 三、仪器与实验试剂 2、实验试剂： 2.1、双缩脲试剂：取1.5g硫酸铜（CuSO4·5H2O）和6.0g酒石酸钾钠（NaKC4H406·4H2O）溶于500ml蒸馏水中，搅拌加入300ml的10% NaOH液（可另加1gKI以防止Cu离子自动还原成一价氧化亚铜沉淀），用水释至1000ml。此试剂可长期保存。若有黑色沉淀产生需重配。 （已配制好，可直接取用） 实验一 蛋白质含量测定--双缩脲法 三、仪器与实验试剂 2、实验试剂： 2.2 标准蛋白溶液：10mg/ml的酪蛋白溶液可用0.9%NaCl溶液配制 2.3 待测样品液：用酪蛋白配制 实验一 蛋白质含量测定--双缩脲法 四、实验操作方法 1．标准曲线的绘制 取干净试管6支，按0、1、2、3