第三章酶的分离与纯化.pptVIP

Chapter 3 The Extraction, Separation and Purification of Enzyme 酶的分离纯化 Contents of chapter 3 酶的提取是指在一定的条件下，用适当的溶剂或溶液处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂或溶液中的过程。也称为酶的抽提。 酶提取时首先应根据酶的结构和溶解性质，选择适当的溶剂。一般说来，极性物质易溶于极性溶剂中，非极性物质易溶于非极性的有机溶剂中，酸性物质易溶于碱性溶剂中，碱性物质易溶于酸性溶剂中。 酶都能溶解于水，通常可用水或稀酸、稀碱、稀盐溶液等进行提取，有些酶与脂质结合或含有较多的非极性基团，则可用有机溶剂提取。 为了提高酶的提取率并防止酶的变性失活，在提取过程中还要注意控制好温度、pH值等提取条件。 3.4 酶的分离方法 （2）等电点沉淀(isoelectric precipitation) 1）原理 蛋白质在等电点时溶解度最低 不同的蛋白质具有不同的等电点 2）使用方法 单独使用较少（用于从粗酶液中除去某些等电点相 距较大的杂蛋白），多与其它方法联合使用（如盐析 法、有机溶剂法），因蛋白质在等电点时仍有一定 的溶解度。 3）优点： a.大多数蛋白质的pI都在偏酸性范围内 b.无机酸（如磷酸、盐酸、硫酸）