生物化学实验讲义.pdf

一 生物化学实验记录及报告 由于生物化学实验的对象是生命体或是生物活性物质，在实验中很容易受外 界环境条件的影响，而引起实验结果的差异。因此，在实验记录和写实验报告时， 需要实验者做到仔细、认真、实事求是，只有这样才能获得真实可靠的实验结果。 在实验课前应认真预习，初步了解验目的、实验原理，对操作方法及步骤要 做到心中有数，最好写一个预习提纲，将实验步骤简要的写出来。 在实验中要对观察到的结果及数据及时记录。记录时要准确、客观，切忌夹 杂主观因素，例如在做一些颜色反应实验时，要根据实验中出现的真实颜色记录， 真实的实验记录才是今后结果分析的可靠依据，因此切勿根据课本中已经了解的 可能出现的现象做虚假记录。实验中配制溶液的过程、加样的体积、使用仪器的 类型以及试剂的规格、浓度都应该记录清楚，以便在总结实验时，查找实验失败 的原因。另外，实验时的环境条件（如温度、湿度、光度等级）及反应时间也要 认真记录，详细的记录才能成为今后实验的参考数据。 二、实验报告 实验结束后，应及时整理和总结实验数据，写出实验报告。一份好的实验报 告包括以下内容。 1. 标题应包括实验时间、实验地点、实验组号、实验者姓名、实验室条件(如 温度、湿度) 2. 3. 应简明扼要地阐述实验的理论指导，使未做过实验的人看后对该实验有一个 4. 要描述自己的操作过程及方法，不能完全照抄实验指导书，可简明扼要地把 实验步骤一步步写出，也可用工艺流程图或表格形式按照先后顺序表示。实验步 - 1 - 5. 将实验中的现象、数据进行整理、分析，得出相应的结论。在生物化学实验 中最常用的多以图表法来表示实验结果，这样可使实验结果清楚明了。特别在生 化实验中通过对标准样品的一系列分析测定，制作图表或绘制标准曲线等，为以 后待测样品的分析提供方便的条件。如通过实验值在图表中直接查出结果。现将 (1)列表法：通常将实验所得的出表格。通常在表格的第一行和第一列标出 数据的名称或单位，其余行列内只填数字。有的表格在中间或末端的一行内还要 填上反应条件如“水浴中加5min (2)作图法：实验所得一系列数据之 间的关系及变化情况，常常可用图线表示，这样可直观地分析实验数据。图表法 比较适用于实验数据较多情况，但不易清楚地表示数据的情况。如生化实验中用 比色法测定未知样品浓度时，常常采用绘制已知标准样品浓度的工作曲线，然后 在同样工作条件下测定未知样品，用所得的数据从标准工作曲线中查出未知样品 的浓度。作图时，首先要在坐标纸上标出坐标轴，标明轴的名称和单位，然后在 横轴和纵轴上一一找出实验交叉点，用“×”或“·”标注上，再用直线或平滑 线将各点连接起来。图线不一定经过所有实验数据点，但要求线必须尽量通过或 靠近大多数数据点。个别偏离过大的点应舍弃，或重复试验进行校正。此外在图 6. 讨论部分是对整个实验过程、实验结果的总结、分析。对得到的正常结果和 出现的异常现象以及教师提出的思考题的探讨、研究。 二、容量玻璃器皿的使用方法 吸管是生物化学实验中常用的卸量容器。移取溶液时，如吸管不干燥，应预 先用所吸取的溶液将吸管润洗2-3 次，以确保所吸取的操作溶液浓度不变。吸取 溶液时，一般用右手的大拇指和中指拿住管颈刻度线上方，把管尖插入溶液中， 左手拿吸耳球先把球内空气压出，然后把吸耳球尖端接在吸管口，慢慢松开左手 指，使溶液吸入管内。当液面升高至刻度以上时，移开吸耳球，立即用右手的食 指按住管口，大拇指和中指拿住吸管刻度线上方再使吸管离液的弯月面与刻度标 线相切时，立即用食指压紧管口，取出吸管，插入接受器中，管尖仍靠在接受器 内壁，此时吸管应垂直，接受器约呈现15°夹角。松开食指让管内溶液自然地 - 2 - 沿器壁流下。遗留在吸管尖端的溶液及停留的时间要根据吸管的种类进行不同处 1.无分度吸管(单刻度吸管，移液管) 使用普通无分度吸管卸量时，管尖所遗留的少量溶液不要吹出，停留等待 3s 2.分度吸管(多刻度吸管、直管吸管) (1)完全流出式：上有零刻度，下方无总量刻度的，或上有总量刻度，下无 零刻度的为完全流出式。这种吸管又分为慢流速、