2.2.1-动物细胞培养(1).pptVIP

专题2.2动物细胞工程 动物细胞工程 其中，动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 动物细胞工程常用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 教学目标 新课标要求 简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 教学重点 动物细胞培养的过程及条件。 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 教学难点 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 资料：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。 一、动物细胞培养 结合图2-16，阅读P44最后一段至P46第一段结束。 1、找出关键词并理解它们的含义。 2、叙述动物细胞培养的过程。 细胞贴壁 细胞的接触抑制 原代培养 传代培养 细胞悬液 3、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样 最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多。 动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产品。 一、动物细胞培养 1.概念：动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 原理：细胞增殖 目的：获得细胞或细胞产品。 2.过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 剪碎组织 分散成单个细胞 细胞悬液 10~50代细胞 发生癌变 无限传代 培养液 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 原代培养 传代培养 不死性细胞 继续传代培养 （第1代细胞到第10代细胞） 细胞的生长特性 ●细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 ●细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 细胞贴壁 培养器皿 返回 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液（原代细胞） 10代细胞 40~50代细胞 无限增殖 传代培养 单个细胞 加培养液 原代培养 胰蛋白酶 剪碎 细胞株 细胞系 原代培养：第1代细胞传至10代左右 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养。 细胞株：10到40、50代的细胞，遗传物质没发生改变。 细胞系：超过50代的细胞，遗传物质发生改变，失去接触抑制，可无限增殖。 过程点拨： 等同于 癌细胞 寻根问底 1.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 细胞间的成分主要是蛋白质。 不行，胃蛋白酶适宜的PH约为2，当PH6时，胃蛋白酶就会失去活性，而胰蛋白酶适宜PH为7.2---8.4，多数动物细胞培养的适宜PH为7.2---7.4。胃蛋白酶在此环境中没有活性，胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。 2.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？ 细胞膜成分：磷脂和蛋白质 长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用。 因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。 3.目前使用的或冷冻保存的正常细胞为几代以内的？ 10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。 5、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 6、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 成块组织不利于培养，分散了并制成细胞悬浊液，利于细胞与培养液充分接触，利于培养。 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多。 动物细胞培养的目的是获得细胞或细胞产品。 4、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ 分化程度低,分裂和增殖旺盛，易培养 思考