《灵芝子实体中灵芝酸A及麦角甾醇含量检测方法》征求意见稿.doc

ICS FORMTEXT 65.020.01 FORMTEXT B 30 FORMTEXT ????? FORMTEXT ZSJX 团体标准 T/ZSJX FORMTEXT XX— FORMTEXT XXXX FORMTEXT ????? FORMTEXT 灵芝子实体中灵芝酸A及麦角甾醇含量 检测方法 FORMTEXT ????? FORMTEXT ????? FORMDROPDOWN FORMTEXT ????? FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布 FORMTEXT - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施 FORMTEXT 中国食用菌协会???发布 T/ZSJX XXXX—XXXX PAGE I 目次 TOC \h \z \t"前言、引言标题,1,参考文献、索引标题,1,章标题,1,参考文献,1,附录标识,1,一级条标题, 3" 前??言 II 1　范围 1 2　规范性引用文件 1 3　术语和定义 1 4　灵芝酸A含量检测 1 4.1　方法概述 1 4.2　仪器设备 1 4.3　试剂材料 1 4.4　测试方法 2 4.5　结果计算 2 5　麦角甾醇含量测定 3 5.1　方法概述 3 5.2　仪器设备 3 5.3　试剂材料 3 5.4　测试方法 3 6　精密度 4 6.1　重复性 4 6.2　再现性 4 附录A（资料性附录）　标准品色谱图 5 前??言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中国食用菌协会提出并归口。 本标准起草单位：XXXXX、XXXXX、XXXXX 本标准主要起草人：XXX、XXX、XXX 灵芝子实体中灵芝酸A及麦角甾醇含量检测方法 范围 本标准规定了灵芝子实体中灵芝酸A及麦角甾醇含量检测方法。 本标准适用于灵芝子实体、子实体提取物及其相关制品。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 12728-2006 食用菌术语 术语和定义 GB/T 12728-2006界定的术语适用于本文件。 灵芝酸A含量检测 方法概述 试样经甲醇超声提取，提取液经减压浓缩后，用甲醇溶解，高效液相色谱法测定，以保留时间进行定性，外标法定量。 仪器设备 高效液相色谱仪，配紫外检测器或二极管阵列检测器 超声波清洗器，功率大于 450 W，频率 50 Hz～100 Hz 分析天平，感量 0.01 g和感量 0.0001 g 样品粉碎机 旋转蒸发仪 试剂材料 除非另有规定，所有试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T 6682中规定的三级水要求，色谱用水符合GB/T 6682中规定的一级水要求。 甲醇：色谱纯。 甲酸：色谱纯。 乙腈：色谱纯。 灵芝酸A（CAS号81907-62-2）：纯度≥ 96 %。 有机系滤膜：0.45 μm。 测试方法 供试品溶液制备 取灵芝产品，粉碎，过二号筛。称取粉末 0.5 g 于 50 mL离心管中，精密称定，加入甲醇 25 mL，置于超声波清洗器中超声提取 30 min。提取液冷却后过滤，取滤液5mL置于10mL刻度试管中，于50℃左右氮气吹干，残留物用1.0ml甲醇溶解，0.45 μm滤膜过滤，取续滤液，作为供试品溶液。 对照品溶液制备 准确称取灵芝酸A标准品 10 mg，精密称定，置 10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度摇匀，即得对照品储备液。 色谱参考条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（150 mm×4.6 mm，5μm）；以乙腈： 0.1 %甲酸溶液（30:70）为流动相，检测波长为 258 nm，柱温为 40 ℃；流速为 1.0 mL/min；进样量为 20 μL。 理论板数按灵芝酸A峰计算应不低于 10000。 重复性：对照品图谱中，灵芝酸A的峰面积RSD应不大于 2.0 %。 分离度：供试品图谱中，灵芝酸A与相邻峰的分离度应大于 1.5 。 标准曲线制备 准确吸取适量标准品储备液用甲醇稀释，配制质量浓度为1.00μg/mL、2.00μg/mL、5.00μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL和50.0μg/mL的标准工作液，按参考色谱条件测定，以灵芝酸A的质量浓度为横坐标，相应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线或计算线性回归方程。 测定 取供试品溶液 20 μL，注入液相色谱仪，按4.4.3 色谱参考条件与系统适用性