常规透射电镜生样品制备技术.docVIP

常规透射电镜生物样品制备技术 取材：组织块约1mm3，悬浮细胞离心后体积约1 mm3 固定： 2.5%戊二醛，4 QUOTE 冰箱固定1.5小时或更长时间 用0.1M磷酸缓冲液漂洗 20min QUOTE 3次 2%锇酸固定液固定 1.5h 用0.1M磷酸缓冲液漂洗 5min QUOTE 2次 脱水： 30%乙醇 5min 50%乙醇 5min 70%乙醇 10min，可4 QUOTE 冰箱过夜。以上操作在冰盒里进行 80%乙醇 15min 95%乙醇 15min 100%乙醇（无水硫酸钠处理）20min QUOTE 2次 100%丙酮（无水硫酸钠处理）15min QUOTE 2次 渗透： 纯丙酮+包埋液( 1 : 2 )室温 1-1.5h 纯包埋液室温过夜 包埋： 用812包埋剂将样品包埋在包埋槽 37 QUOTE 烘箱内过夜 45 QUOTE 烘箱内12h 60 QUOTE 烘箱内48h 超薄切片机切片70nm 2%醋酸铀-柠檬酸铅双染色 透射电镜观察，拍片。