浙江高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段名师精编课件 新人教版选修1.pptVIP

知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 2.实验中DNA含量的测定 DNA在260 nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰,峰值的大小与DNA的含量有关。可以利用DNA这一特点进行DNA含量的测定,具体方法如下: (1)稀释:2 μL PCR反应液,加入98 μL蒸馏水,即将样品进行50倍稀释 ↓ (2)对照调零:以蒸馏水作为空白对照,在波长260 nm 处,将紫外分光光度计的读数调节至零 ↓ (3)测定:取DNA稀释液100 μL至比色杯中,测定260 nm处的光吸收值 知识架构 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 ↓ (4)计算:DNA含量(μg/mL)=50×(260 nm的读数)×稀释倍数 一 二 知识精要 典题例解 迁移应用 知识架构 【例2】 下列有关PCR操作过程的叙述,错误的是 (　　) A.PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌 B.PCR缓冲液和酶应分装成小份,在-20 ℃储存 C.PCR所用缓冲液和酶从冰箱拿出之后,迅速融化 D.在微量离心管中添加反应成分时,每吸取一种试剂后,移液器上的吸液枪头都必须更换 解析：为了防止外源DNA的污染,PCR反应中所用的微量离心管、枪头、缓冲液及蒸馏水等,在使用前要进行高压灭菌;还要将所用的缓冲液和酶分装成小份;并且使用一次性吸液枪头,A、B、D三项都正确。在使用前,将PCR所需试