降解菌和吸附菌的联合作用对混合染料的脱色研究.doc

降解菌和吸附菌的联合作用对混合染料的脱色研究　 　　含染料废水的色度脱除一直是印染行业和染料工业所面临的重大问题之一。我国作为世界上染料生产和使用的主要国家，该类废水的污染尤为严重。近20年来，先后有多种物理、化学和生物的方法被用于含染料废水的脱色处理。其中生物强化处理技术，即通过筛选或构建具有高效降解或吸附性能的特定微生物菌株用于含染料废水的处理和脱色，因显示出经济、高效、适于大规模废水处理等特点，更是受到人们的极大关注。但这些研究大多为纯培养单菌株对单一染料的脱色作用。而实际的含染料废水中往往含有多种染料，来自生产过程的有色废水中还含有各种染料中间体。另一方面，单菌株也难以完成对废水中所有染料及其中间体的脱色作用。因此考察多菌株的联合作用对混合染料的处理和脱色具有重要的理论和实际意义。本文考察了在单菌株纯培养条件下，溴氨酸降解菌BX26或高效广谱吸附菌GX2对由活性艳蓝KNR和其中间体溴氨酸组成的混合染料的脱色行为；在此基础上，进一步考察了BX26和GX2的联合作用对单溴氨酸、单KNR以及溴氨酸和KNR的混合染料的脱色性能，同时考察了作用过程中两菌株的数量消长和种群变化。 材料和方法 　　1 菌株：溴氨酸降解菌BX26（黄杆菌属）和高效广谱吸附菌GX2（青霉菌属）。　　2 培养基：可溶性淀粉，10g；NaCl，0.5g；KNO3，1g；K2HPO4·3H2O，0.5g；MgSO4·7H2O，0.5g；FeCl3，10mg；H2O，1000mL；pH7.5±0.1。在考察单一染料的脱色时，培养基中加入单种溴氨酸或KNR染料，浓度为120mg/L；在考察混合染料的脱色时，培养基中同时加入溴氨酸和KNR，浓度均为120mg/L。　　3 培养方法：BX26种子液为培养36h的BX26培养液；GX2种子液为用50mL无菌水冲洗GX2斜面而制成的孢子悬浊液。两种子液均按5%的接种量接种于含有40mL染料培养液的150mL锥形瓶中，即向每瓶中加入2mL种子液。在考察单菌株的脱色作用时，接入单BX26或单GX2菌；在考察菌株的联合作用时，同时接入BX26和GX2，接入比例分别为2mL BX26和0.1mL GX2、 2mL BX26和2mL GX2、0.1mL BX26和2mL GX2。将接入菌体的染料培养液摇床培养（120rpm，30℃）。　　4 染料浓度的测定：每24h取样1mL，10000rpm下离心15min后测定上清液吸光度。单一溴氨酸和KNR吸光度的测定分别在其最大可见光区吸收波长485和600nm处进行。混合染料的测定则是分别在485nm和600nm处测定上清液吸光度，并按下式计算混合染料中溴氨酸和KNR的吸光度：AKNR , 600nm = A混合染料, 600nm；A溴氨酸,485nm = A混合染料,485nm - 0.269×AKNR, 600nm。再借助工作曲线计算各染料浓度。　　5 菌体生长的测定：BX26的生长测定采用涂布平板法，培养基用LB培养基。GX2的生长测定方法如下：脱色实验结束后，3000rpm离心15min收集菌体并用去离子水洗涤6次，置于50℃烘箱中烘至恒重，用电子天平测菌体干重。 结果与讨论 　　1 在溴氨酸降解菌BX26纯培养条件下，混合染料中溴氨酸和KNR的脱色行为：在单一染料和混合染料中，溴氨酸脱色行为大致相同：染料都从24h启动脱色，72h接近完全脱色，这说明KNR的存在对BX26对溴氨酸的降解脱色没有任何影响，BX26可以有效地去除混合染料中的溴氨酸。KNR的脱色行为在单一染料和混合染料中也大致相同：48h内染料浓度没有变化，48h后出现微弱下降，这是由于BX26对KNR的微弱吸附所致。对BX26离心后，确发现BX26菌体表现出KNR的蓝色。　　2 在高效广谱吸附菌GX2纯培养下，混合染料中溴氨酸和KNR的脱色行为：在单一染料和混合染料下，溴氨酸均表现出较大程度的脱色：96h单一染料中的溴氨酸脱色率为76%，混合染料中的溴氨酸脱色率为66%，前者明显高于后者。这是因为在混合染料中，GX2对溴氨酸和KNR的吸附存在竞争；而且由于KNR较之溴氨酸具有更大的疏水结构，在吸附竞争中占有优势，使得混合染料中溴氨酸的吸附脱色较之单一染料时表现出一定程度的减弱。　　在单一染料和混合染料中，96h的KNR脱色率均超过95%，表现了GX2对KNR良好的吸附脱色能力。虽然在混合染料中存在着KNR与溴氨酸的吸附竞争，但由于KNR在竞争中占有明显优势，因此溴氨酸的存在对GX2对KNR的吸附影响不大。故混合染料中KNR的吸附脱色率较之单一染料时也只有微弱下降。另外还需指出的是，虽然GX2对混合染料中溴氨酸和KNR的吸附率表现出一定的差异，但混合染料中高达95%的KNR脱色率和66%的溴氨酸脱色