膜片钳技术及应用.pptVIP

高阻封接形成的电流图 膜片钳技术四种基本记录模式 细胞吸附膜片(cell-attached?patch) 将两次拉制后经加热抛光的微管电极置于清洁的细胞膜表面上，形成高阻封接，在细胞膜表面隔离出一小片膜，既而通过微管电极对膜片进行电压钳制，高分辨测量膜电流，称为细胞贴附膜片。由于不破坏细胞的完整性， 全细胞记录法(Whole-cell? recording)????? 在高阻抗封接做好后，再给一个很小的负压，将电极覆盖的膜吸破，使电极内与整个细胞内相通，用这个方法可记录进出整个细胞的电流。 内面向外膜片(inside-out?patch) 高阻封接形成后，在将微管电极轻轻提起，使其与细胞分离，电极端形成密封小泡，在空气中短暂暴露几秒钟后，小泡破裂再回到溶液中就得到“内面向外”膜片。 外面向外膜片（Outside-out patch ） 在全胞记录式的基础上，拉开电极使之与胞体脱离，这是附在电极尖端的膜片又可自动地将电极尖端口封住。此膜片的外侧面向外其是在全细胞记录的基础上改进而成。 膜片钳技术的应用 2008年，第二军医大学基础部生物物理研究所的研究人员采用膜片钳和激光扫描共聚焦显微镜，同步实时系统观察心肌细胞钙离子的释放。 基本原理 膜片钳能获得膜上钙离子通道的离子电流，但不能对离子的移动进行实时定位， 不能定量分