细胞电生理学与膜片钳技术.pptVIP

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  • 2019-08-29 发布于湖北
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内面向外膜片 (inside-out patch) 在细胞吸附模式高阻封接形成后,将微管电极提起,使吸附的膜片从胞体上被切割下来,就得到“内面向外”膜片。此种模式,可直接且自由地经浴液介导而调控细胞内液的条件,并可在和细胞活动无关的形式下观察到单一离子通道的活动。但是,由于胞质渗漏,可能丢失某种通道调控因子,离子通道活动出现run-down (或run-up)现象。 全细胞记录式 (Whole-cell recording) 在细胞吸附模式下继续以负压抽吸使电极管内细胞膜破裂,电极胞内液与胞内液直接相通,而与浴槽液绝缘,这种形式记录膜片以外部位的全细胞膜的离子电流。它既可记录膜电位又可记录膜电流。其中膜电位可在电流钳情况下记录,或将玻管连到标准高阻微电极放大器上记录。 外面向外膜片 (outside-out patch) 在全细胞模式上将微管电极向上提起,可得到切割分离的膜片,断端游离部分自行融合成脂质双层,此时高阻封接仍然存在。而膜外侧面接触浴槽液。用这种模式,可自由改变细胞外液的情况下,记录单一离子通道的电流活动。 开放细胞吸附膜内面向外模式(open cell-attached inside-out mode) 将细胞吸附式的膜片以外的某部位的胞膜进行机械地破坏,经破坏孔调控细胞内液,并在细胞吸附状态下进行内面向外的单一离子通道记录。这种方法的细胞体积越大,破坏部位离被吸附膜

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