骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞与Wntβ-catenin通路中β-catenin的关系分析.docxVIP

本课题获得以下资助： 本课题获得以下资助： 湖南省自然基金1 3 j j 50 1 9 摘要目的 摘要 目的 扩张型心肌病(dilated cardiomyoPathy，DCM)为死亡率较高的一种疾 病，目前尚未报道其有效的治疗措施。近些年研究的干细胞治疗技术为 它带来了新的曙光。本研究试图通过5-aza诱导骨髓间充质干细胞分化 为心肌细胞，并了解在该过程中Wnt／13．catenin信号通路是否参与分化过 程的调控，旨在为临床充分利用来源丰富的BMSCs(bone marrow mesenchymal cells，BMSCs)移植治疗终末期扩张型心肌病提供有效的实验依 据。 方法： 从2009左右的SD雄性大鼠股骨提取BMSCs，利用贴壁培养方法， 篷 培养至P3代细胞后利用流式细胞仪(flow cytometry，FCM)来检测细 胞的表面抗原：主要选取CD29、CD34、CD45、CDl05等四种表面抗 原进行检测，从而达到鉴定骨髓间充质干细胞的目的。台盼蓝染色计数 细胞活性。选择活性较好，纯度较高的细胞制成细胞悬液，随机均匀分 成a组、b组、c组、d组，分别用O岬ol／L，5I_tmol／L，lOItmol／L，201．Lmol／L 的5-aza进行干预，2周后比较总体细胞水平的活性率及心肌细胞的百分 比，从而确定诱导分化的最佳浓度。此后将P3代骨髓间充质干细胞随 机分