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自身抗体谱临床解读 1 概 述 自身抗体：指针对自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白，见于多种风湿性疾病，尤其在弥漫性结缔组织病中更为常见，对临床风湿病诊断意义重大。 目前用于临床的常见自身抗体有抗核抗体谱、抗中性粒细胞胞浆抗体、抗磷脂抗体、类风湿因子、抗线粒体抗体等。 3 自身抗体的临床意义 自身抗体在CTD中有特殊意义 疾病的筛选 具有诊断意义的标记 与病情及预后相关 与某些临床表现相关 与疾病的发病机制有关 评估风湿性疾病重要的参数之一 研究疾病的重要方向之一 4 自身抗体检测方法 间接免疫荧光法（IF）：不溶性成分 酶联免疫吸附法（ELISA）； 放射免疫法（RIA）； 对流免疫电泳法（CIE）； 免疫双扩散法（ID）； 免疫印迹法：针对可溶性成分（如ENA、DNA、 凝血因子、补体） 5 抗核抗体（Antinuclear Antibody, ANA）传统定义：将针对细胞核内成分的抗体称为ANA。现在对ANA靶抗原的理解已从细胞核扩大到整个细胞。是指抗核酸（nucleic acid）和核蛋白（nucleoprotein）抗体的总称。 6 ANA测定原理和方法： 间接免疫荧光法（IIF):现多以Hep-2细胞（人喉癌上皮细胞）为底物（Ag)，其以核质丰富而极大地提高了ANA检测的阳性率和滴度。 是系统性红斑狼疮（SLE）的标准筛选试验。 我们实验室采用欧蒙荧光检测系统，将1:100作为血清起始稀释度，所以如果是低滴度的1:100阳性，只能视为一个临界可疑值，临床意义不大。 ANA作为自身免疫性结缔组织病的筛选试验必须强调高滴度。 7 ANA的意义 ANA（＋）结果的出现率取决于以下因素： 分析系统：由于不同厂家ANA检测系统的起始稀释度和稀释 因子不同，因而不同厂家的ANA滴度结果不能直接进行比较。 区分血清（＋）与（－）的选定的滴度值，未加稀释的正常人 血清可有1/3的呈阳性ANA反应。 是SLE独立的诊断条件之一。 滴度本身与疾病的活动度并不相关，没有评价预后的意义。 筛查风湿病，敏感性高。 ANA（＋）可出现在多种情况下，特异性差。 8 ANA（＋）的原因 风湿性疾病 SLE 多发性肌炎 干燥综合征 硬皮病 血管炎 RA 正常的健康人 女性＞男性，出现率随年龄而增加 风湿性疾病患者亲属 ？孕妇 药物诱导 慢性肝脏疾病 慢性肺部疾病 慢性感染 血液系统异常 恶性肿瘤 9 SLE患者使用IIF法测定ANA阴性的一些解释 技术方面 临床方面 经皮质激素或免疫抑制剂治疗。 终末期肾病。 隐蔽ANA：与循环中免疫复合物结合，沉积于组织。 由于大量蛋白尿而从肾脏丢失。 10 ANA的荧光染色型别 细胞核： 核均质型（DNA、组蛋白和核小体等） 核颗粒型（Sm、uRNP、SS-A、SS-B、Ku、I和Ⅱ型周期蛋白） 核膜型（板层素、gp120等） 核仁型（SCL-70、PM-SCL、RNA多聚酶、原纤维蛋白等） 核浆点型（着丝点、核多点及核少点型） 细胞浆： 胞浆颗粒型（线粒体、Jo-1、核糖体等） 胞浆纤维型：波形蛋白、原肌球蛋白和肌动蛋白等 分裂期细胞阳性：纺垂体、中间体、中心体等 根据产生的荧光模型、靶抗原的分布部位分类如下： 11 核颗粒型：核粗颗粒型 12 抗核抗体染色类型 核仁型（nucleolar） 13 均质性 （ homogeneous ） 14 斑点型（speckled） 15 ANA的 荧光类型 ANA试验的结果中一般会报告其分型，这些分型可能与某一特定的抗原反应活性相关。 分型 相关疾病 核仁型 硬皮病 着丝点型 CREST综合征 周边型 SLE 斑点型/弥散型 混合性结缔组织病（MCTD） 16 ANAs的分类： 抗DNA抗体 抗组蛋白抗体 抗非组蛋白抗体 抗着丝点抗体： 抗核小体抗体 17 抗DNA抗体 已确认出两大类抗体特异性： 天然的双链DNA（dsDNA）：对诊断SLE特异性高 变性的单链DNA（ssDNA） 多数实验室采用以下方法进行测定： 放射免疫分析法（RIA，Farr分析法）：定量 酶联免疫吸附法（ELISA）：定量 间接免疫荧光法（ IIF，短膜虫法）：半定量 抗体水平与疾病活动度相关，随着疾病活动的控制，抗dsDNA抗体滴度可以下降或消失。 抗dsDNA抗体与SLE肾损伤有关：DNA形成免疫复合物在肾小球基底膜沉积，或抗dsDNA抗体直接作用于肾小球抗原。强烈提示其致病作用。 18 抗核糖体P抗体（又称为：抗rRNP抗体） 针对3磷蛋白P0、P1和P2的抗体。 诊断SLE的高度特异性标记物。 在10－15％的SLE患者中出现。 抗体水平与疾病的活动度相关。 与狼疮脑病有关。 19 抗组蛋白抗体