细胞融合及单克隆抗体的制备.pptVIP

细胞融合单克隆抗体制备技术 1.细胞融合（Cell Fusion） 细胞融合：即两个或两个以上细胞合并成一 个细胞的过程，即将两个离体细胞在特殊融 合剂的作用下，细胞膜发生一定变化，使两 个或多个细胞发生融合，形成体细胞杂交 (Somatic Hybridization)，产生一个新的杂 种细胞(Hybrid) 。 细胞融合剂 病毒类 化合物 生物制剂 2.单克隆抗体技术 Epitope, Antigenic determinant抗原决定簇 一个抗原分子上可能有数个抗原决定簇 每个抗原决定簇至少诱生一种专一性抗体 蛋白质性抗原决定簇含有六个以上氨基酸 多克隆抗体(Polyclonal antibody,PcAb)： 针对多种抗原决定簇的混合抗体 单克隆抗体(Monoclonal antibody,McAb): 由单个B细胞克隆产生的针对单一抗原 决定簇的同源抗体 单克隆抗体技术操作流程 常规免疫法 改进后的方法： 在适当稀释的杂交瘤阳性克隆上清中加上过量 抗原，再用上述致敏的红细胞（指示细胞）进 行检测，则为血凝抑制。改进后的血凝抑制试 验是种检测抗体特异性的简单有效的方法。 原理：当鼠McAb与靶细胞表面抗原结合 形成膜Ag-Ab复合物后，加入适量补体， 在补体介导下，使细胞破坏（打孔），以 致细胞破裂死亡。 单抗纯化方法 盐析 凝胶