第12章RNA的生物合成转录.pptVIP

转录因子（transcription factors，TF） 能结合到DNA的特殊序列并且与RNA聚合酶结合， 促进转录的蛋白质因子。 TF I： 促进RNA聚合酶I转录 TF II：促进RNA聚合酶II（TFIIA，B，D，E，F，H ） TF III：促进RNA聚合酶III转录。 反式作用因子 1. 启动子（promoter） 启动子是DNA模板上的一段特殊序列。转录开始时，RNA聚合酶识别和结合于启动子。它包括一些保守顺序，如GC盒、CAAT盒和TATA盒子。为顺式作用元件。 2. 转录因子ＩＩ及转录前起始复合物（PIC）的形成 第四节 原核生物的转录 RNA的转录开始于pppG 或 pppA。转录起始位置在Pribnow盒子下游5-8bp。 RNA聚合酶（全酶）中的σ因子在DNA双链上迅速、随机滑动，寻找到启动子-35区，结合形成闭合的复合物，DNA双链未解开。 全酶形成更紧密的开环复合物，其特征是DNA双螺旋局部解开大约10bp。因为Pribnow 盒子是富含AT的，它有利于这种局部的解旋。 解链的DNA与起始的三磷酸嘌呤核苷酸（pppG 或 pppA）及RNA聚合酶结合，然后形成第一个磷酸二酯键。 全酶移动到另一个位置并继续合成。一旦起始的核苷酸链形成一小段后，σ因子便从全酶释放出来，核心酶进入延长阶段继续发挥其催化作用。 另外一个RNA聚合酶分子可以识别并结合到启动子上，开始另一轮转录。这样，一个基因可以被同时转录许多次。 第五节 RNA依赖的RNA合成 RNA的复制 二、转录的延长（elongation） σ亚基脱落，RNA聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿DNA模板前移，催化RNA链不断延长。 （NMP）n + NTP （NMP）n+1 + PPi 转录复合物： RNA聚合酶核心酶，DNA模板，RNA产物。 DNA解开17 bp；RNA-DNA形成12bp长的杂交螺旋 三、 RNA合成的终止（termination） 依赖Rho（ρ）因子的转录终止 非依赖ρ因子的转录终止 转录至模板某一位置，停止形成磷酸二酯键 RNA—DNA杂交链解开，DNA解链的部分重新形成双螺旋 RNA聚合酶离开DNA 分类： 核不均一RNA（heterogeneous-nuclear RNA, hnRNA）： 细胞核内的初级转录产物。需要经过剪接才能成为成熟的mRNA。 小核RNA（small nuclear RNA, snRNA）： 在细胞核内与蛋白质组成核糖核酸蛋白体，即剪接体（splicesome），结合在hnRNA的内含子区段，使之弯曲，形成套索结构，有利于剪接。 mRNA 剪接（mRNA splicing） 真核生物结构基因转录时，外显子和内含子同时被转录，产物为hnRNA，而后切除hnRNA中的内含子，将外显子连接的过程成为mRNA剪接。 剪接类型：snRNA剪接方式 剪接位点：作为内含子起始和结束的GU、AG剪接 点序列成为剪接位点。 （二） 5’端加帽 5’端：m7GpppGpN（甲基化三磷酸双鸟苷） 部位：细胞核 作用: 1）使mRNA免受磷酸酶和核酸酶的攻击， 稳定mRNA分子的一级结构； 2）提供核蛋白体识别位点，促进翻译起 始复合物形成，增强mRNA翻译效率； 3）有利于mRNA前体的剪接。 mRNA 的5’帽子结构 5? pppGp… 5? GpppGp… pppG ppi 鸟苷酸转移酶 5? m7GpppGp… 甲基转移酶 SAM 5? ppGp… 磷酸酶 Pi 帽子结构的生成 （三）mRNA的3’端加polyA尾 3’端：100-200个腺苷酸残基 部位：细胞核 作用: 1）维持mRNA的稳定； 2）增加翻译效率； 3）与mRNA运输有关。 转录终止序列：DNA 的特殊序列与转录的终止有关。 编码链 5‘-----AAUAAA 加尾 步骤1 步骤2 3’端加polyA尾 （四） mRNA 编辑（mRNA editing） DNA在转录成hnRNA后，通过插入、删除或碱基替换而改变DNA模板原来的某些遗传信息。 通常是个别碱基的更换使一个基因表达出多个氨基酸序列不同的蛋白质。 是对生物学中心法则的补充，扩大了mRNA遗传信息容量。 第2153位 谷氨酰胺 终止子 二、核糖体RNA（rRNA）的转录后加工 rDNA 内含子 基因间隔 18S 5.8S 28S 每个