第三章 分子荧光光度法.pptVIP

* 第三章 分子荧光光度法 §3-1 分子荧光概述 分子荧光法的分析一般都在溶液中进行，如前所述每个分子都具有一系列严格的分立能级： 图中S0表示分子的基态，S1、S2分别为第一激发单重态和第二激发单重态；T为激发三重态；基态和激发态都存在几个不同的振动能级。P.82 物质吸收了电磁辐射并发射出荧光的过程中大致会经历以下几个过程： 1.激发： 通常在室温下，大部分分子处于基态的最低振动能级，含有偶数个电子且自旋配对，处于基态单重态(sinlet state；Pauli原理)；当其吸收一定频率的电磁辐射(光量子)后电子可发生能级跃迁至第一激发单重态(S1)，这一过程称为激发。 2.去活化过程： 处于激发态的分子是不稳定的，可通过几种不同的途径回到基态，这一过程称为去活化。去活化过程主要有以下几种： (1)振动驰豫： 溶液中分子之间通过碰撞，受激溶质分子向溶剂分子转移过剩的振动能量，以10-13~10-11秒的速度，通过非辐射跃迁而降至同一电子能级的最低振动能级。这一过程称为振动驰豫。 (2)荧光发射： 处于第一激发单重态最低振动能级的分子，有几种可能的去活化过程发生，其中之一是以10-9~10-7秒左右的时间内发射光量子回到基态的各振动能级，这一过程称为荧光发射。 (3)内转移： 激发态分子从较高的电子能级转换至较低的电子能级。内转移过