血清肌酐Creatine苦味酸法测定.doc

血清肌酐Creatine苦味酸法测定 实验原理 不去除蛋白的Jaffe碱性苦味酸连续监测比色法。肌酐与苦味酸在碱性条件下形成橙红色复合物，在固定的时间内吸光度增加速率与样品中肌酐浓度呈正比。 肌酐 + 苦味酸 肌酐苦味酸复合物 2. 标本采集 2.1 病人准备：早晨空腹采血（空腹12小时左右），静脉采血。 2.2 类型：血清，肝素血浆，尿液。 3. 标本存放：血清、血浆的稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存至少可稳定3个月。尿液的稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定6天；-20℃保存可稳定6个月 对尿液用蒸馏水作1:49稀释后检测，结果乘50后报告。 4. 标本运输：常温条件下运输 5. 标本拒收的标准：细菌污染的标本不能作测定。 6. 实验材料 6.1 奥林巴斯肌酐检测 试剂盒试剂1：＋试剂2： 6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.4 注意事项：试剂1中含氢氧化钠。请按以下条例处理：R36/38: 刺激眼睛和皮肤。S26:如与眼睛接触应立即用大量水冲洗并请医生诊视。S37/39:戴上手套并采取合适的眼/脸的防护。S45:如发生事故或感觉不适立即请医生诊视。试剂2中含苦味酸。吸入、接触皮肤、吞咽将会中毒。戴上手套并采取合适的眼/脸的防护。如与皮肤接触应立即用聚乙二醇400（DAB8）或大量水冲洗。如情况严重，立即请医生诊视。使用实验室试剂应采取必要的预防。 6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪 8. 操作步骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件 9. 结果的判断与分析 10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。 11. 计算方法：以TruCal U复合校准品肌酐校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠检测结果，以mmol/L报告。 12. 参考值范围 血清/血浆[1] 女性 53～97mmol/L 男性 80～115mmol/L 尿液[1] 女性 97～177mmol/L 男性 124～230mmol/L 肌酐清除率[2] 女性 95～160ml/min/1.73m2 男性 98～156 ml/min/1.73m2 13. 临床意义：肌酐是通过肾脏经由肾小球滤过作用排泄的废物。健康人血浆中肌酐的浓度相当稳定，与每天水的摄取量、活动和生成尿量无关。因此血浆肌酐水平升高常指示排泄量的降低，即肾功能受损。肌酐清除率能较好地评估肾小球滤过率（GFR），通过它能较好地检出肾病和监视肾功能。为此，在规定的时间内同时收集血清和尿液，进行肌酐检测。 肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收,通过肾小管排泄。在肾脏疾病初期,血清肌酐值通常不升高,直至肾脏实质性损害,血清肌酐值才增高。在正常肾血流条件下，肌酐值如升高至176～353μmol/L,提示为中度至严重的肾损害。所以,血肌酐测定对晚期肾脏病临床意义较大。 14. 操作性能 14.1 线性范围：18～1330μmol/L 14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内不精密度小于3%，总不精密度小于5%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。 批内精密度 n=20 (?mol/L) s (?mol/L) CV (%) 批间精密度 n=20 (?mol/L) s (?mol/L) CV (%) 样品1 71.6 2.6 3.63 样品1 69.8 4.5 6.45 样品2 141.4 1.2 0.87 样品2 137.9 3.3 2.38 样品3 506.5 4.3 0.85 样品3 507.4 4.2 0.83 14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对68个样品进行Crea检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.01x-2.65?mol/L；r =1.000。 14.4