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倪培华-检验系-凝胶层析 蛋白质分离技术-层析 上海交通大学医学院 倪培华 副教授 一、概述 1、定义 层析(又名色谱) 一种利用混合物中各组分的物理化学性质间的差异，使各组分在层析两相中以不同程度分配，借此将各组分分离。 1903年 俄国植物学家 茨维特 发表了有关填充以菊根粉的玻璃柱分离植物色素，以石油醚冲洗，得到黄色、绿色区带; 1970s早期 高效液相色谱法（HPLC) 目前 气相层析仪和HPLC与色谱、质谱以及计算机联用。 层析法进行时有两个相，一个相称为固定相，另一相称为流动相。 2.按层析的机制可分为 吸附层析 分配层析 凝胶层析 亲和层析 离子交换层析 （1）吸附层析 定义 指混合物随流动相通过吸附剂时，由于吸附剂对不同物质的吸附力而使混合物分离的方法。 原理 在不同条件下，吸附剂与被吸附物之间的作用 物理作用的范德华吸附：无选择性，吸附速度快，吸附的过程是可逆的 化学吸附：由原子价力的作用引起。有选择性，吸附速度较慢，不易解吸 吸附层析 常用的吸附剂 （2）分配层析 ——利用不同组分在流动相和固定相中的分配系数不同而进行分离的方法。 柱层析 进样量大且容易回收 薄层层析 小量样品，快速