血清甘油三酯酶试剂法测定法.doc

血清甘油三酯酶试剂法测定法 实验原理 脂蛋白酯酶（LPL）、甘油激酶（GK）、甘油-3-磷酸氧化酶（GPO）、过氧化物酶(POD)、Trinder反应偶联比色终点法。 反应式如下： LPL 甘油三酯 + H2O 甘油 + 脂肪酸 GK 甘油 + ATP 甘油-3-磷酸 + ADP GPO 甘油-3-磷酸 + O2 二羟丙酮磷酸 + H2O2 POD 2H2O2 + 4-氨基安替比林 + 4-氯酚 醌亚胺 + HCl + 4H2O 2. 标本： 2.1 病人准备：12小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或EDTA抗凝血浆。 3. 标本存放：血清稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定1周；-20℃保存至少可稳定1年。 4. 标本运输：常温条件下保存运输。 5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂 威特曼甘油三脂试剂盒 试剂1 试剂2 6.1.1试剂准备：试剂为即用式。 6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.4 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95 g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂 6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪 8. 操作步骤 8.1 项目基本参数：参见AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件 8.2 仪器操作步骤：参见AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件 9. 检验结果的判断与分析 10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP文件。 11. 计算方法：以TruCal U复合校准品甘油三脂校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。 12. 参考值范围（单位：mmol/L） 合适范围： ￡ 2.3mmol/L 高度危险临界值： 2.3～4.5mmol/L 高度危险范围： 4.5mmol/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。 13. 临床意义：甘油三酯是甘油与3个脂肪酸形成的酯，是天然脂肪中含量最多的。在血液中，甘油三酯和载脂蛋白结合形成极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒，运送到全身。甘油三酯的检测用于对脂肪状态的过筛，以检出致动脉粥样硬化的危险；监视降脂治疗的效果。近期的研究说明，甘油三酯的增高同时伴有低密度脂蛋白（LDL）的升高，特别对发生冠心病（CHD）具有高度危险。甘油三酯的升高也和肝、肾以及胰腺疾病有关。 流行病学研究观察到，若同时出现血清甘油三酯2mmol/L、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）1.0mmol/L，说明未来发生冠心病（CHD）的危险性很高。甘油三酯临界值（2.3mmol/L）的临床应用需结合CHD的其他危险因子。 14. 操作性能 14.1 线性范围：0.01～11.3mmol/L。 14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内精密度小于3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。 批内精密度 n=20 (mmol/L) s (mmol/L) CV (%) 天间精密度 n=20 (mmol/L) s (mmol/L) CV (%) 样品1 0.91 0.014 1.53 样品1 1.13 0.018 1.60 样品2 1.20 0.022 1.82 样品2 2.00 0.021 1.04 样品3 2.40 0.035 1.47 样品3 2.29 0.024 1.06 14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对77个样品进行TG检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.98x+0.014mmol/L；r=0.993。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.01mmol/L。 14.5 病人结果可报告范围：0