生物分离技术应用综合实验.pptVIP

实验二、植物色素的分离纯化 五、实验注意事项 5、要注意控制流速，不宜过快。 6、在加入好样品后（在洗壁前）就要接收洗脱液。 7、柱子预处理时的流出液用三角瓶或烧杯接收，而上样后的色素洗脱液则用试管接收。 8、所预留的纯化液50ml和10ml，必须是在所有洗脱下来的A值大于0.1的纯化液混匀后才能取液。 实验三、植物色素的定量与初步鉴定 （三）目的物质的纯度测定： 取实验一中所得的提取液50ml，放置在已经烘干，并已经称好质量为m1的小烧杯中，放在真空干燥箱中干燥，干燥到恒重后，称其重量m2，得色素浸膏重量为（m2 －m1），再根据上面第（二）中的公式算出总黄酮含量m总，则其纯度为： 目的物质的纯化前纯度= C纯化×50 ×100% m2 －m1 实验三、植物色素的定量与初步鉴定 （三）目的物质的纯度测定 纯化倍数计算： m = 目的物质的纯化后纯度 目的物质的纯化前纯度 实验三、植物色素的定量与初步鉴定 五、实验注意事项 3、在测定洗脱液的A值时，若洗脱液经过稀释到n倍后再测定时，则须在原来的C纯化数值的基础上在乘以稀释倍数n，在去计算相应的得率和纯度。 在此情况下，测定液相当于稀释了两次，一次是样液本身的稀释，另一次是样液测定时加入的显色剂使之稀释到10倍。计算时的倍数是两次稀释倍数的乘积。 4、每天的水浴锅、烘箱、水龙头、门窗等在晚上离开实验室时必须关闭。 生物分离技术综合实验—植物色素提取、分离及定量与初步鉴定 实验一、 植物色素的制备 一、实验目的: 了解有机溶剂提取目的物质（植物色素）的过程与注意事项。并了解目的物质提取过程中的主要影响因子及其相互关系。 二 实验原理： 用有机溶剂法从原料中提取黄酮类成分,利用黄酮类物质在热乙醇中溶解度较高,将其提取出。 实验一、 植物色素的制备 三、 仪器 高速干粉粉碎机、恒温水浴锅、烧杯试管若干、中低速离心机、过滤装置（漏斗和滤纸），250ml磨口椎形瓶6个/每组；10ml容量瓶4个/组。 四、试剂 配40%（80ml/组）、70%（450 ml/组）的乙醇，10％硝酸铝溶液50ml/组，5％亚硝酸钠50 ml/组, 质量分数4.3％氢氧化钠200 ml/组。 实验一、 植物色素的制备 五、操作 1、不同浸提剂浓度对黄酮提取率的影响 1.1取干粉原料15克，分成6组（2.5克每组），用8倍体积（指料液比v/m为8：1）即20ml的40%、70%，95%的乙醇浸提（温度70℃，时间1.5h），浸提时每隔15 min用手轻摇2min。浸提所得粗液进行离心（4500r/min20min），得浸提上清液。 1.2 精密吸取上清液1.0 mL，分别置于10 mL容量瓶中，加质量分数5％亚硝酸钠0.4 mL，放置6 min后，加质量分数10％硝酸铝0.4 mL，放置6 min，再加质量分数4.3％氢氧化钠4 mL，加蒸馏水至刻度，摇匀，放置15 min，在510nm波长下测得其吸光度值，得出最优的浸提剂浓度。 （按三个水平，每个水平做两组操作，即每个单因素条件得六个数据。） 实验一、 植物色素的制备 2、不同浸提时间对黄酮提取率的影响 2.1 取干粉原料15克，分成6组（2.5克每组），用按8：1（指料液比v/m）的70%乙醇浸提（温度70℃），浸提时间分别为90min、120min，150min，浸提时每隔15分钟用手轻摇2min。浸提所得粗液进行离心（4500r/min20min），得浸提上清液。 2.2 精密吸取上清液1.0 mL，分别置于10 mL容量瓶中，加质量分数5％亚硝酸钠0.4 mL，放置6 min后，加质量分数10％硝酸铝0.4 mL，放置6 min，再加质量分数4.3％氢氧化钠4 mL，加蒸馏水至刻度，摇匀，放置15 min，在510nm波长下测得其吸光度值，得出最优的浸提时间。 （按三个水平，每个水平做两组操作每个水平做两组操作，即每个单因素条件做六个数据。） 实验一、 植物色素的制备 3、不同料液比对黄酮提取率的影响 3.1 取干粉原料15克，分成6组（2.5克每组），用按6：1，8：1，10：1（指料液比v/m，即ml/克）的70%乙醇浸提（温度70℃，时间1.5h），浸提时每隔15分钟用手轻摇2min。浸提所得粗液进行离心（4500r/min20min），得浸提上清液。 3.2 精密吸取上清液1.0 mL，分别置于10 mL容量瓶中，加质量分数5％亚硝酸钠0.4 mL，放置6 min后，加质量分数10％硝酸铝0.4 mL，放置