感染性疾病的免疫学检测.ppt

感染性疾病的免疫学检测;实验一 乙型肝炎病毒表面抗体检测;实验目的;实验原理;试剂及器材 ;取出包被好抗原的酶标板;操作步骤 ;结果判断;实验讨论 ;注意事项;实验二 HBsAg不同检测方法的最低检测限（验证性实验） ;实验目的;实验方案;实验原理（一） 胶体金免疫层析技术;;实验原理（三）;实验试剂及器材;操作步骤（一）确定临界值浓度;C5;表1.不同浓度HBsAg标准物质稀释参照表;（二）胶体金操作方法 顺序将胶体金试纸条浸入血清（不要超过最高检测线）5秒钟后取出，平置，20分钟后判断结果。 ;（三）ELISA操作步骤 加样 不同稀释度的阳性血清（均做双孔测定）及阴性对照、阳性对照、弱阳性对照血清，分别加入对应的反应孔，留1孔做空白对照，置37 ℃水浴60min。 加酶 每孔加入酶标记抗体50ul,空白对照孔不加，置37℃水浴30min。 洗涤 甩去各孔内液体，拍干，用洗涤液洗孔6次，每次均拍干。 加酶底物/色原溶液 加显色剂A液、B液每孔各50ul， 37℃水浴30min显色。 加终止液 每孔50ul。 读数 在酶标仪上于450nm波长处读取吸光度值（A），以空白孔校零点，分别测定阴性对照、阳性对照、弱阳性对照及样本孔的A值。;操作实例：ELISA(双抗体夹心法）;结果判断;表3.重复检测次数与样本的实际浓度;表4.-20%～+20%浓度范围是否包含了C5-C95区间 ;最低检测限的判断;实验注意事项;实验结果分析;;实验讨论;实验讨论;实验三 抗链球菌溶血素O检测 ;实验目的;ASO检测方法;实验原理;实验试剂及器材;操作步骤;操作步骤;结果判断;间接乳胶凝集实验的结果判断;实验注意事项;全自动速率散射比浊方法;试剂及器材;操作步骤;结果判断;实验讨论;实验四 梅毒螺旋体抗体检测;实验目的;梅毒螺旋体感染的常用检测方法;（一） TRUST实验;实验试剂及器材;操作步骤;;结果分析;实验注意事项;临床意义 ;（二） TPPA法-检测特异性抗体;实验试剂及器材;;结果分析;2）最终判定基准：未致敏粒子的反应图像应为阴性。致敏粒子（最终稀释度1:80及以上）反应图像为阳性，最终应判定为阳性。反应图像为阳性的最终稀释倍数作为抗体效价。;注意事项;临床意义 ;实验讨???;实验讨论;实验讨论;实验讨论;实验五 人类巨细胞病毒抗体IgM检测;实验目的;实验原理;实验试剂及器材;操作步骤;结果判断;注意事项;实验讨论;实验讨论;实验讨论;病案讨论;患者，男，49岁主诉“右上腹隐痛、腹胀隐痛8年，反复牙龈出血2年” 体格检查：巩膜黄染，腹壁静脉曲张，肝脏于肋下4横指可触及，质硬，压痛，腹水征阳性。CT示：肝左叶大，肝裂增宽。 实验室检查：HGB:115g/L，WBC：5.4X109/L，NEU:41.6%，LYM:57.3%,PLT：96 X109/L血清抗HCV抗体：阳性，HCV-RNA：9.26X104copies/ml,其余肝炎病毒血清标志物检查均为阴性，肝功能：ALB:29.6g/L，GLB:37.4g/L A/G:0.8，PA:54mg/L，ALT:146 U/L ，AST:249U/L，ALP:213U/L，r-GGT:169U/L，CHE:1858U/L，TBA:130.4umol/L，T-Bil:46.1 mmol/L ,D-Bil：26.8 mmol/L ，LDH:,337 U/L, a-HBD:234U/L。 问题： 请结合以上资料，分析该患者可能的诊断及实验室诊断依据？;患者右上腹隐痛不适、腹胀8年，肝脾肿大，腹壁静脉曲张，腹水征阳性，提示存在门脉高压，伴腹水，肝脏血清酶增高明显，胆红素升高；应考虑肝硬化或肝癌。 近两年反复出现牙龈出血，考虑因肝脏合成凝血因子减少以及脾功能亢进致血小板减少导致凝血功能障碍所致。提示肝脏功能已经失代偿，出现肝功能严重受损的各种症状。 丙型肝炎病毒抗体阳性， HCV-RNA拷贝数高，提示病因为丙型肝炎病毒感染，肝脾增大，影像学检查无肝内占位性病变，可排除肝癌。 诊断：丙型肝炎后肝硬化肝功能失代偿期。 ;患者，女性，25岁，主诉“会阴部皮疹3月余，全身皮疹伴腹股沟淋巴结肿大半月余” 体格检查：肛门周围及外阴部大小阴唇间有隆起的丘疹，部分融合，表面平坦，表面湿烂，有少许渗出液。双侧下颌、颈前、腹股沟处可扪及多个拇指大小肿大淋巴结，轻压痛。 实验室检查：血清TRUST阳性，TPPA阳性，滴度为1:640，宫颈分泌物查衣原体抗体阴性，脑脊液TPPA阴性。 问题： 请结合以上资料，分析该患者可能的诊断及实验室诊断依据？;根据主诉和体格检查，患者有逐渐加重的皮