第十三章 发酵实例.ppt

淀粉水解糖质量对谷氨酸发酵的影响很大 ◆ 如果淀粉水解不完全，有糊精存在，不仅造成浪费，还会产生过多泡沫，影响发酵的正常进行。 ◆ 若淀粉水解过分，葡萄糖发生复合反应生成龙胆二糖、异麦芽糖等非发酵性糖，同时葡萄糖发生分解反应，生成5-羟甲基糠醛，并进一步分解生成有机酸和黑色素等物质，对菌体生长和谷氨酸发酵均有抑制作用。 发酵控制 氮 源 ◇尿素 ◇ 玉米浆、麸皮水解液 ◇液氨 ◇碳酸氢铵 ◆ 30～80%的氮用于合成谷氨酸 发酵控制 C / N ? C / N = 100 ： 15 ～ 30 （比 一般高；100 ：0.2 -2.0 ) ? 在发酵的不同阶段控制不同的C/N 在长菌阶段，如NH4+过量会抑制菌体生长； 在产酸阶段，如NH4+不足，谷氨酸的积累减少。 发酵控制 生长因子： ? 目前以糖质原料为碳源的谷氨酸产生菌均为生物素缺陷型，以生物素为生长因子 ? 生物素的作用主要是影响谷氨酸产生菌细胞膜对谷氨酸的通透性 ? 用量：菌体生长所需的“亚适量”；一般5?g/L 生物素过量，不产或少产谷氨酸； 生物素不足，菌体生长不好，谷氨酸产量也低。 发酵控制 提供生长因子的农副产品原料： ? 玉米浆 ? 麸皮水解液 ? 糖蜜 ? 酵母 发酵控制 2）温度 ? 最适生长温度 30～34℃ ? 谷氨酸产生的最适温度35～37℃ ? 可采用变温控制 发酵控制 3）pH 发酵前期控制在7.5 左右 发酵中期7.2 发酵后期7.0 临近放罐时6.5～6.8 发酵控制 调节pH方法： ? 尿素流加法 国内厂家多采用 ? 液氨或氨水添加法 液氨含氨量99-99.8% ;氨水含氨量20-25% 国外多采用该法 发酵控制 4）供氧 ? 在菌体生长期 供氧必须满足菌体呼吸的需氧量 ? 谷氨酸生成期 应充分供氧（在细胞最大呼吸速 率时，谷氨酸产量大） 发酵控制 三） 谷氨酸提取 等电点法 离子交换法 金属盐法 盐酸水解— 等电点法 离子交换膜电透析法 国内多采用等电点—锌盐法 该法收率可达85～90% 等电点—锌盐法工艺简介： 1、先采用等电点法提取谷氨酸 ( 回收70%左右 ） 1）原 理 ? pH = pI 时谷氨酸的溶解度最小 ? 谷氨酸的等电点 pI = (pK1 + pK2)/2 = (2.19 + 4.25)/2 = 3.22 ? 将发酵液调至pH = 3.2，使谷氨酸处于过饱和 状态而结晶析出 2）谷氨酸的晶型及性质 在不同条件下会形成两种不同的晶体 ? ?-型晶体： 斜方六面体；纯度高，颗粒大，质量好，与 母液分离容易；为理想的晶型 ? ? -型晶体： 粉状或针状、鳞片状；晶体微细，纯度低，晶体 无光泽；质量轻，难沉淀；生产上应避免形成该 类晶体 3）影响谷氨酸结晶的主要因素 A) 温度与降温速度 ? 当结晶析出温度超过30℃， ? -型晶体明显增加 ? 因此须把发酵液的温度降到30℃以下，再进行 晶体析出。 ? 中和时要控制液温缓慢下降，不能回升 降温过快或忽高忽低，则晶核小而多、结晶微细； 且会引起?-型向? -型转变 B) 加酸速度与终pH的影响 ? 若加酸速度太快，会局部过饱和，出现大量细小晶核，形成?-型晶体 ? 开始加酸至pH5左右，加酸可快些；pH5以下、起晶前后，加酸速度要慢，须小心 ? 发现晶核时，应立即停止加酸，育晶2h，使晶核成长，然后再继续缓慢加酸中和至pH3.2。 C) 投晶种 起晶有两法 自然起晶 加晶种起晶 ? 加晶种起晶，晶核容易控制，不易出现?-型晶体 ? 但必须注意晶种的质量 （选择较好的?-型晶体）并应掌握好投晶种的时机 D) 搅拌的影响 ? 搅拌有利于晶体长大，避免“晶簇”生成 ? 太快，液体翻动剧烈，会引起晶体的磨损，不利晶体长大，使晶体细小。 ? 太慢，晶体容易下沉，pH和温度不均匀，引起局部pH过低，易生成?-型晶体。 ? 一般采用：桨式搅拌器；25～35rpm 2、再用锌盐法进一步提取 （总回收可达80～90%） 原 理 ◆ 在一定pH 条件下 (pH 6.3)，谷氨酸与锌离子 生成难溶于水的谷氨酸锌沉淀下来 ◆ 在酸性条件下，溶解谷氨酸锌；再调pH至2.4， 谷氨酸结晶析出 由于溶液中锌离子浓度很高，产生共存离子效应，使谷氨酸