血常规复检、镜检标准操作程序.docVIP

宜兴市官林医院检验科 常规室作业指导书 文件编号：GLYY-3-XY-09 版本/修订号：1/0 主题内容 血常规复检、镜检 生效日期：2012.8.8 第 PAGE 10 页 共 NUMPAGES 10 页 血常规复检、镜检标准操作程序 目的 用于指导血常规复检、镜检。 该SOP的变动程序 标准操作程序的变动可由任一是用本程序的工作人员提出并报经下述人员批准签字： 专业主管、科主任。 血常规复检、镜检标准 WBC小于3.0×109或大于15×109；100fl-150fl出现高尖峰； PLT小于60×109； Hb小于50g/L； 特殊病人和特殊病情； 必须复查，必须推血片镜检； 并登记。 操作程序 1.由本科工作人员重新采血。 1.立即测定室内质控，观测结果是非在控，在控，则再次测定，确认。并手工计数，参照相关手工计数操作程序。 结果不在控，查找原因，排除后，则再测室内质控测定。在控确认，则再次测定。确认。并手工计数，参照相关手工计数操作程序。 涂片染色镜检。 白细胞手工计数 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血。 标本要求：抗凝剂采用EDTA K2抗凝。 用手指末梢血作白细胞检验时，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。 标本储存：取材后应立即推制成血涂片，并尽快送检。 标本运输：保持干燥，室温运输。 血液经稀酸稀释后,成熟红细胞全部被溶解,注入计数池后,在显微镜下计数白细胞. 《试剂》 冰醋酸 2ml 蒸馏水 98ml 操作步骤 1 . 用吸管准确吸取末梢血20ul（WBC小于3.0×109吸取40 ul）；拭去管尖外部的余血,将吸管插入小试管中稀释液的底部,轻轻将血放出,并吸取上层清液,洗试管数次,最后混合. 2. 充池,静置2-3分钟,待白细胞下沉. 3. 用低倍镜计数4角4个大方格内的白细胞数. 计算 白细胞数/L=4个大方格内白细胞总数×50×106 参考范围 成人:(4-10)×109/L 儿童:(5-12)×109/L 新生儿:(15-20)×109/L 注意事项 1.标本采集时不能挤压过甚,针刺深度必须适当. 2．大小方格内压线细胞应按数上不数下,数左不数右的原则进行计数. 3．稀释液要过滤,小试管,计数板必须清洁,以免杂质,微粒等误认为细胞. 4. 计数时,两次重复计数误差不得超过10%. 涂片染色检查。 方法学原理 用瑞氏染色法，对制备好的血涂片进行染色，然后在显微镜下进行形态检查。 实验材料：瑞氏血细胞染色液，生产厂家：（台资）珠海贝索生物技术有限公司。 实验仪器：LEICA CME显微镜 操作步骤： 1.采血后推制厚薄适宜的的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。 2.瑞氏染色：将制好的干燥血涂片平置于染色架上，滴加瑞氏染色液A液3-5滴使其迅速盖满血膜，然后加瑞氏染色B液3-5滴，轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使A、B染液充分混匀，染色1-2分钟（气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间），用自来水冲去染液，待干。 3.高倍镜（必要时油镜）观察细胞形态。 4.结果判断与分析 白细胞核象变化 (1) 核左移：说明外周血中幼稚或杆状核粒细胞增多，见于急性白血病，急性化脓性细菌感染，急性中毒，急性溶血。正常妊娠、缺氧及低血压也可出现细胞核左移现象。 (2) 核右移：说明中性粒细胞核分叶过多，见于巨幼细胞性贫血，恶性贫血，化疗及炎症恢复期，遗传性中性粒细胞分叶过多，尿毒症等。巨多核中性粒细胞：成熟中性细胞胞体增大，核分叶过多，常为5-9叶，甚至12-15叶。各叶大小差别很大，常见于巨幼细胞性贫血。此外，在疾病进行期突然出现核右移，表示预后不良。 (3) 分叶过少：乳酸缺乏症，假性pelger-huet异常等。 其他核异常 环形或面包圈型核：见于慢粒，慢性粒细胞白血病，骨髓异常增生综合征等。中性粒细胞形态变化 中性粒细胞的毒性变化： 1） 细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。 2） 中毒颗粒：比正常中性颗粒粗大，大小不等，分布不均匀，染色较深，呈黑色或紫黑色。有时颗粒很粗大，与嗜碱粒细胞易混淆；有时小而稀少，散杂在正常中性颗粒之中。 含中毒颗粒的中性粒细胞应与嗜碱粒细胞区别，其要点：嗜碱粒细胞核较少分叶、染色较浅、颗粒较大、大小不均、着色更深、细胞边缘处常分布较多，可分布于核上，胞浆中常见小空泡。在血片染色偏碱或染色时间过长时，易将中性颗粒误认为中毒颗粒。但只要注意全片各种细胞的染色情况，则不难区别。 含中毒颗粒细胞在中性细胞中所占比值称为毒性指数。毒性指数愈大，提示中毒变性结果。 3） 空泡：可为单个，但常为多个。大小不等，亦可在核中出现。被认为是细胞脂肪变性的结果。 4） Dohle体：是中性粒细胞胞浆内因毒性变而保留