SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量.pdfVIP

SDS-聚丙烯酰胺凝 胶电泳法测定蛋白 质分子量 二、实验目的 学习SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS- PAGE，polyacrylamide gel electrophoresis ）的基本原理 掌握SDS测定蛋白质相对分子 量的方法 二、实验原理 电泳 电泳介质——聚丙烯酰胺凝胶 缓冲液pH蛋白质pI，蛋白质带负电荷，向电 场正极移动 影响蛋白迁移率的因素：静电荷，蛋白颗粒 大小、形状，电场强度 SDS：与蛋白分子成比例结合→带负电荷复合 物，消除不同蛋白间原有电荷差 蛋白Mr: 15x103 3 -200x10 时, 迁移率与logMr呈线性 浓缩、分离两层胶：浓缩效应+分子筛效应 电泳的基本原理 丙烯酰胺+双丙烯酰胺→三维网状孔结构 TEMED：四甲基乙二胺