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智能多功能肝素酶生产低分子量肝素工艺研究 1 1,2 3 1 1 叶逢春 、东乡昌宏 、陈银 、张翀 、邢新会 1 清华大学化工系生物化工研究所 2 日本东京工业大学生命理工学研究科 3 英国华威大学生物科学系 摘要：低分子量肝素（Low molecular weight heparin, LMWH）作为抗凝试剂和抗栓试剂 肝素理想替代品，目前已在临床得到了广泛的应用。但清洁高效低分子量肝素制备技术的缺 乏却极大地限制其应用。在众多低分子量肝素制备技术中，酶降解法以其反应条件温和性、 无毒且易实现生产连续化的优势脱颖而出。本实验室前期从一株肝素黄杆菌中克隆得到肝素 酶I 的基因，利用融合蛋白技术构建了高效生产可溶性肝素酶I 的基因工程菌株，为酶法制 备低分子肝素技术的发展提供了基础。一方面，麦芽糖结合蛋白（MBP）的融合可以稳定高 效地实现肝素酶Ⅰ的可溶性表达，并利用其亲和性能实现酶的分离纯化及固定化；另一方面， 绿色荧光蛋白（GFP）的引入，利用荧光