膜片钳实验与技术.ppt

膜片钳实验与技术;;;目 录;一、离子通道的概念;;二、离子通道的分子结构;１．电压门控离子通道的基本结构;;;;;;２．化学门控离子通道的基本结构;乙酰胆碱门控离子通道 ;三、离子通道的分类; 1、非门控性离子通道; 2、电压门控离子通道 ; 电压门控钠离子通道 ;电压门控钙离子通道 ;电压门控钾离子通道 ;3、化学门控离子通道 ;4、机械门控离子通道 ; 5、其它门控离子通道;四、离子通道的研究技术;1、电压钳技术;; ;;;2、膜片钳技术;Patch clamp;;; 3、膜片钳记录的模式 ; 4、膜片钳实验系统的组建 ;视频监视器;五、膜片钳实验方法 ; 1、微电极的制备;;;;2、细胞标本的制备;3、高阻封接的形成;;; 单通道电流记录 ; 全细胞电流记录;　　全细胞记录模式可用于测定在某个时间和电压情况下，离子通道电流的大小，观察其电压依赖性特征，如以膜电位为横座标，电流强度为纵座标，则可绘制出电流-电压关系曲线（I-V曲线）。在电流为零时的膜电位被称为反转电位。 I-V曲线和反转电位反映了某种通道的电压依赖性及药物等因素对通道电压依赖性的影响，常作为全细胞记录模式结果分析的指标之一。 　　;;;;;;;;　 为证实所测电流为钠电流，常借助于工具药，如河豚素（TTX）用于细胞外液中，可以选择性阻断钠