观察DNA和RNA在细胞中的分布--实验方案.docxVIP

《观察 DNA和 RNA在细胞中的分布》 实验方案 第二组 目录 一、 实验前的思考 3 二、 背景资料 3 1. 核酸是什么 ? 3 2. DNA 是什么 ? 3 3. RNA 是什么 ? 3 4. DNA 的种类和分布 3 5. RNA的种类和分布 4 6. 染色剂成分 5 7. 染色原理 5 三、 实验原理 5 四、 实验目的 6 五、 实验用具及试剂 6 六、 实验方法及步骤分析 6 1. 实验材料 6 2. 实验方法 6 七、 注意事项 9 八、 附录 9 1. 试剂配制方法 9 2. 重要仪器的使用方法 9 观察 DNA和 RNA在细胞中的分布 一、实验前的思考 实验前已经知道的知识 通过实验想知道的知识 实验之后获得了的知识 显微镜的使用方法；1.Unna 试剂 如何将 DNA 1. 对 Unna 试剂与核酸结 2. 临时装片的制作方法； 和 RNA 染上不同颜色； 合的染色原理有了更深 3. 细胞中含有 DNA和 RNA 2. 材料的选择、用不用盐 刻的认识； 两种核酸， DNA主要分布在细胞核中， RNA大部分存在于细胞质中； 细胞的基本结构。  酸水解、染色时间等对染 2. 比较分析不同实验步色效果分别有什么影响， 骤所获得的实验效果，学 如何获得最佳的实验效 会优化实验； 果。 3. 验证了 DNA 和 RNA 在 细胞中分布，对理论知识 有了深刻感知。 二、背景资料 核酸是什么 ? 核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之 一。DNA和 RNA都是由一个一个核苷酸 (nucleotide) 头尾相连而形成的。单个核苷酸是由含氮有机碱 ( 称碱基 ) 、戊糖 ( 即五碳糖 ) 和磷酸三部分构成的。 根据化学组成不同，核酸可分为核糖核酸（简称 RNA）和脱氧核糖核酸（简称 DNA）。核酸是相邻二个核苷酸之间的连接键即： 3’，5’－磷酸二酯键。这种连接可理解为核糖核酸基上的 3 位羟基与相邻 5 核苷酸的磷酸残基之间，以及核苷酸糖基上的 5 位羟基与相邻 3 核苷酸的磷酸残基之间形成的两个酯键。 DNA是什么 ? DNA是由数量庞大的四种脱氧核苷酸按一定碱基顺序彼此用 3’， 5’ - 磷酸 二酯键相连构成的长链。 RNA是什么 ? RNA由核糖核苷酸经磷酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷 酸，核糖和碱基构成。 RNA的碱基主要有 4 种，即 A 腺嘌呤， G鸟嘌呤， C胞嘧啶， U尿嘧啶。其中， U 尿嘧啶取代了 DNA中的 T 胸腺嘧啶而成为 RNA的特征碱基。 DNA的种类和分布 原核细胞的遗传物质是一个长 DNA分子，但是原核细胞没有真正的细胞核。真核细胞核中有不止一个染色体， 每个染色体也只含一个 DNA分子。不过它们一般都比原核细胞中的 DNA分子大而且和蛋白质结合在一起。 DNA分子的功能是贮存决定物种的所有蛋白质和 RNA结构的全部遗传信息； 策划生物有次序地合成细胞和组织组分的时间和空间； 确定生物生命周期自始至终的活性和确定生物的个性。除染色体 DNA外，有极少量结构不同的 DNA存在于真核细胞的线粒体和叶绿体中。 DNA病毒的遗传物质也是 DNA。 RNA的种类和分布 信使 RNA。mRNA的功能就是把 DNA上的遗传信息精确无误地转录下来， 然后再由 mRNA的碱基顺序决定蛋白质的氨基酸顺序，完成基因表过程中的遗传信息传递过程。在真核生物中，转录形成的前体 RNA中含有大量非编码序列，大约只有25%序列经加工成为 mRNA，最后翻译为蛋白质。 转运 RNA。如果说 mRNA是合成蛋白质的蓝图， 则核糖体是合成蛋白质的工厂。但是，合成蛋白质的原材料—— 20 种氨基酸与 mRNA的碱基之间缺乏特殊的亲和力。因此，必须用一种特殊的 RNA——转移 RNA（transferRNA ，tRNA）把氨基酸搬运到核糖体上， tRNA能根据 mRNA的遗传密码依次准确地将它携带的氨基酸连结起来形成多肽链。 每种氨基酸可与 1-4 种 tRNA相结合，已知的 tRNA的种类在 种以上。 核糖体 RNA（ribosomalRNA），rRNA是组成核糖体的主要成分。核糖体是合成蛋白质的工厂。在大肠杆菌中， rRNA量占细胞总 RNA量的 75%-85%，而 tRNA 15%，mRNA仅占 3-5%。rRNA一般与核糖体蛋白质结合在一起，形成核糖体（ ribosome ），如果把 rRNA从核糖体上除掉，核糖体的结构就会发生塌陷。原核生物的核糖体所含的 rRNA有 5S、16S 及 23S 三种。 MicroRNAs（ miRNAs）是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码 RNA，其大小长约 20~25个核苷酸。成熟的 miRNAs是由较长的