FoLin-CiocaLteu法测定多酚含量.docVIP

实验三 FoLin-CiocaLteu法测定多酚含量 1．目的要求 掌握FoLin-CiocaLteu法测定多酚的方法。 2．方法原理 多酚与FoLin-CiocaLteu试剂发生特异性反应，反应产物对特定波长的有最大吸收，且吸光值与多酚的量在一定浓度范围内成线性关系。先以标准酚类物质建立标准曲线，再测定待测样品吸光值，据此可求出待测样品中多酚的含量。 3．主要实验仪器及材料 可见－紫外分光光度计、电子分析天平、钨酸钠(Na2WO4?·2H2O)、钼酸钠( Na2MoO4·2H2O)、磷酸、盐酸、溴水、硫酸锂(Li2SO4)、没食子酸或单宁、碳酸钠。 4．掌握要点 1）掌握FoLin-CiocaLteu在试剂配制方法，2）掌握标准曲线及回归方程的求法；3）掌握样品多酚含量的FoLin-CiocaLteu测定方法。 5．实验内容 1）?FoLin-CiocaLteu试剂的配制：将100g钨酸钠(Na2WO4?·2H2O),?25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水，50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000mL，过滤。滤液呈微绿色。吸取10 mL