菜花中核酸分离.pptVIP

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2019-09-23 发布于广东
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菜花中核酸分离.ppt

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实验五菜花中核酸的分离和鉴定一、核酸的分离 1. 称取10g菜花——剪碎——加入10ml 95％的乙醇（注意分三次添加）——研磨——倒入离心管——v=10000,离心6min 2. 弃去上清液——沉淀中加入10ml丙酮——振荡均匀——离心6min,v=10000 3. 弃去上清液——沉淀在冰盐浴中加入10ml 5%的HClO4 ——振荡均匀——离心6min,v=10000 4. 弃去上清液——沉淀中加入10ml95%的乙醇——振荡均匀——离心6min,v=10000 5. 弃去上清液——沉淀中加入10ml丙酮——振荡均匀——离心6min,v=10000. 6.弃去上清液——沉淀中加入10ml10%的NaCl溶液——振荡均匀——在沸水浴中加热15min——冷却——离心5min,v=6000 7.将上清液倒入试管为提取物一——沉淀中加入5ml 0.5 mol/L 的HClO4 ——在70℃水浴中加热20min——冷却离心5min,v=6000 8.将上清液倒入试管为提取物二——提取物一二做好标记二、核酸的定性鉴定 1.二苯胺反应 2. 苔黑酚反应根据现象分析提取物一和提取物二主要含有什么物质？ * 2 － 1 －－－ 4 沸水中加热10min的现象 2 2 2 2 二苯胺试剂（ml） 1 －－－提取物二（ml）－－－－提取物一（ml）－ 1 －－ RNA溶液（ml）－－ 1 － DNA溶液（ml）－－－ 1 DW （ml） 5 3 2 1 试管号沸水中加热10min后的现象 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 苔黑酚乙醇溶液（ml） 2 2 2 2 2 FeCl3浓HCl溶液（ml） 1 提取物二（ml） 1 提取物一（ml） 1 RNA溶液（ml） 1 DNA溶液（ml） 1 DW（ml） 10 9 8 7 6 试管号 *