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- 2019-09-14 发布于广东
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DNA的粗提取与鉴定
【复习目标】
通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。
理解DNA粗提取与鉴定的原理
【基础知识】
一、提取DNA的方法
提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质 的生物大分子。对于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物 理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
DNA的溶解性
DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同,利用这一特点,选择
适当的盐浓度就能使 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。
NaCl浓度(mol/L)在什么浓度下,DNA的溶解度最小? DNA在NaCl溶液中的
NaCl浓度(mol/L)
如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析 出?
此外,DNA不溶于 溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,
可以将DNA与蛋白质进一步的分离。
DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
蛋白酶能水解 ,但是对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80X的
高温,而DNA在 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ,但对DNA没有影响。
DNA的鉴定
在 条件下,DNA遇 会被染成 色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA
的试剂。
二、实验设计
实验材料的选取:
凡是含有 的生物材料都可以考虑,但是使用DNA含量较高的
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