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枯草芽孢杆菌发酵的实罐操作;枯草芽孢杆菌的实罐操作 实验材料及仪器设备;防止染菌的要点;空气系统的要求;蒸汽系统的要求;1、连续灭菌设备:连消塔结构要求简单,易于拆装和清理,操作时蒸汽能与物料混合均匀,并易于控制温度。
2、发酵罐:发酵罐及其附属设备应注意严密和防止泄漏,避免形成“死角”。凡与物料、空气、下水道连接的阀门都必须保证严密度。
3、无菌室:用超净工作台及净化室代替无菌室,以提高无菌程度。;一、种子的制备;1.4一级种子的制备
选取长势良好的菌种,挑取菌落2~3环接种导液体摇瓶中。培养条件:180r/min,37摄氏度摇床过夜培养。
1.5二级种子液的制备
将一级种子液接种到药瓶培养基中接种量为5ml。培养条件:180r/min,37摄氏度摇床过夜培养。;二、发酵培养基配置;三、空罐灭菌;四、实灌灭菌;五、接种;接种在无菌环境下进行;六、发酵;
2生长曲线:分光光度计波长600nm测od值(以相同稀释倍数的培养基做空白)。以生长量为纵坐标,培养时间为横坐标绘制生长曲线图。
3淀粉酶活力的测定:
1.发酵液离心处理:8000rpm,5min
2.1ml离心后的发酵液+5ml 1%淀粉溶液与37摄氏度水浴5min终止反应。
3.取上述溶液1ml,加入DNS试剂2.0ml于沸水浴中加热2min进行显色,取出后用水迅速冷却 ,加去9ml蒸馏水,摇匀,在540nm波长处测定吸光值。以1%淀粉溶液直接加热煮沸再加DNS试剂反应作为空白。
;七、发酵过程中参数检测结果;酶活曲线;菌浓曲线;八、实训结果总结及分析;九、实训的后期处理;谢谢观看
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