生物药物分析绪论.ppt

* * * * 光谱鉴别法：1、紫外-可见光谱鉴别法； 2、红外光谱鉴别法； 3、近红外光谱法；4、原子吸收法；5、核磁共振法 * 三磷酸腺苷二钠：本品为辅酶类药，参与体内脂肪、蛋白质、糖和核酸的代谢，是机体能量的重要来源。Lapage于1949年从家兔肌肉分离得到本品，国内于1966年起生产。 结构与性质：本品为腺膘吟核苷-5-三磷酸酯二钠盐。白色或类白色粉末，易溶于水，在乙醇、氯仿或乙醚中几乎不溶。 CHP2005P24 * 色谱法包括：气相色谱、液相色谱、薄层色谱、离子色谱、亲合色谱、超临界流体色谱、毛细管电泳、电色谱等。 * * 色谱法包括：气相色谱、液相色谱、薄层色谱、离子色谱、亲合色谱、超临界流体色谱、毛细管电泳、电色谱等。 * * * * * “药典”既可衡量一个国家有关药品生产技术和监督管理的实际水平，也可在一定程度上反映出这个国家相关学科的综合水平。（安登魁先生） 药典是国家标准的最高形式，高于局（部）标。 新修订《药品管理法》第32条规定：药品必须符合国家药品标准。 国务院药品监督管理部门颁布的《中华人民共和国药典》和药品标准为国家药品标准。 因此，药典是对药品质量的最低要求。 * 官方颁行——药典，区别于其它民间或个人编写的“本草”。 其它民间或个人编写的“本草”：如《神农本草经》、南朝、陶弘景著的《本草经集注》、宋代的《开宝本草》《嘉佑本草》《经史证类备急本草》《本草衍义》，明朝医学家李时珍编写的《本草纲目》等等，是民间或个人编写的，不能算药典。 药典三部凡项：总计七类，二十二条，它们是： 名称及编排：2条，一条和二条 制造：8条，三条至十条 精确度：1条，第十一条 检定方法与限度：2条，十二条和十三条 标准品、参考品、对照品：1条，第十四条 计量：3条，十五条至十七条 包装、标签、使用说明书、贮藏、运输：5条，十八条至二十二条 还有： 常用英文名称缩写与注释 生物制品术语及名诩解释 * * * * * * * * 常用的鉴别方法 * 理化鉴别法 化学反应法 光谱法 色谱法 生化鉴别法 酶法 电泳法 生物鉴别法 血清学法 生物学法 （1）化学鉴别法 * 通常利用药物与某试剂在一定条件下反应，生成有颜色的产物或沉淀进行鉴别。 1、理化鉴别法 举例 * 胰蛋白酶的鉴别：取本品约2mg ，置白色点滴板上，加对甲苯磺酰-L- 精氨酸甲酯盐酸盐试液0.2ml ，摇匀，即显紫色。（呈色法） 胃蛋白酶的鉴别：取本品的水溶液，加鞣酸、没食子酸或多数重金属盐的溶液，即发生沉淀。（沉淀法） 举例 * 硫酸软骨素：为大分子酸性黏多糖类药物，其分子中具有半缩醛基结构，有还原性，与碱性酒石酸铜试液反应，加热，即产生氧化亚铜的红色沉淀。可用于硫酸软骨素的鉴别。 （2）光谱法——紫外分光光度法 * 利用药物分子中含有共轭体系，能吸收紫外光的基团而显示特征吸收光谱，可作为生物药物鉴别的依据。 * 三磷酸腺苷二钠的分子中具有共轭系统，能吸收紫外光。本品的0.01mol／L盐酸水溶液（20μg／ml），在（257±1）nm的波长处有最大吸收。A250nm／A260nm的值应为0.17～0.27。 举例： （3）色谱法——纸色谱法 * 多糖中单糖的组成分析 多糖在矿酸存在下水解成单糖，单糖在浓酸中加热脱水生成糖醛或其衍生物，它们在α-萘酚作用下生成有色物质，可用于糖类的一般鉴别。 样品的制备： 取样品20ml，加0.5—1mol／L硫酸溶液2ml，充氮除氧封管，在100℃水解11h，水解液用碳酸钡中和，离心过滤，滤液进行以下分离鉴定： * 纸色谱法： 取滤液（多糖水解液）点滴于滤纸上，同时点滴D-葡萄糖、D-甘露糖、L-阿拉伯糖、L-鼠李糖、D-木糖、 D-半乳糖等单糖对照品溶液，分别用：①正丁醇—丙酮—水（4：5：1）；②乙酸乙酯—吡啶 —水（10：4：3）；③正丁醇—冰醋酸—水（：1：1）；④正丁醇—浓氨水—水（12：10：1）；⑤乙酸乙酯—吡啶—乙酸—水（10：11：2：3）为展开剂（也可用其他分离单糖的展开剂）进行纸色谱分离。展开后以苯胺—邻苯二甲酸的正丁醇饱和溶液喷雾显色。根据样品和对照品的Rf值及斑点颜色进行鉴定。 （3）色谱法——高效液相色谱法 * 利用对照品溶液和供试品溶液色谱图的保留时间和肽图谱的一致性进行鉴别。 HPLC为越来越多的国家药典采用来进行生物药物的分析，是生物药物最常用的一种分析方法。 2、生化鉴别法 （1）酶法：尿激酶是专属性较强的蛋白水解酶，根据尿激酶能激活牛纤维蛋白溶酶原，而具有相同作用的链激酶不能激活牛纤维蛋白溶酶原而加以区别，并用直接观察溶解纤维蛋白作用的气泡上升法作为判断指标。 * （2）电泳法 肝素的鉴别采用糖凝胶电泳法：肝素是