液相色谱质谱联用.pptVIP

概 述LC-MS联用机遇与挑战; GC-MS : 样品必须气化 不适合极性、热不稳定和大分子化合物。（20%）; LC-MS 接口 (Interface)类型;; Electrospray ionization(ESI) ESI 将溶液中的离子转变为气相离子,进行MS分析，最软的质谱离子化技术。 ; 　　　 不同表面张力溶剂的起始电位（?c ＝0.1mm, d=40mm); 　　　ESI 实验条件优化 １、待测物质在溶液中的状态（溶液化学） 　　待测物质在供试品溶液中以离子状态存在，可提高生成气相离子的效率，提高检测灵敏度。 B + RCOOH BH++RCOO- HA + NH3 A- +NH4+ 2、 溶剂的表面张力 纯水，因表面张力高，所需起始电位Uon高，易产生放电现象； 　　 常用水－甲醇（50:50)溶剂，同时黏度也下降，有利于雾化． 3、 溶液流速 低流速产生细雾滴，有利于产生气相离子，提高信号灵敏度； 高流速范围内，为提高雾化效率，需采用高速同轴气流辅助雾化技术。 4、 雾滴的蒸发速率 提高 雾滴蒸发速率的方法：采用挥发性溶剂；提高“干燥气”温度和流速； 使用加热金属毛细管。 ;5、 气相离子的产生 竞争机制——表面活性高（最低溶剂化能）的离子优先转移至雾滴表面， 最 终转变为气相离子，故有较高的实验灵敏度。 1、 应采用表面活性低的缓冲剂 2、 采用低浓度的挥发性酸、碱及缓冲盐 3 、 用高纯度的溶剂、试剂 4、 样品应作预处理，除去干扰物及盐。; Atmospheric chemical ionization (APCI) 样品溶液借助雾化气的作用，喷入高温（如500℃）蒸发器中，此时溶剂和溶质均为蒸气，由63Ni放射源或放电电极产生低能电子使试剂气，如N 2、O2、H2O、或溶剂B 等离子化，经复杂的一系列反应使溶质产生正或负离子。 N2+e- N2+ +2e- A+BH + AH ++B (质子转移） A+B + A + +B(电荷转移） 　　　Ｍ＋Na +, M+NH4+、M+Ac-、 M+Cl-等。 ;ESI和APCI共同点:1、使用高电压元件和雾化气喷雾法产生离子2、通常产生(M+H)+或(M-H)-等准分子离子3、产生极少的碎片，但可以控制产生结构碎片４、非常灵敏的电离技术。 ;基体辅助激光解吸电离(MALDI);;LC-MS中的色谱技术;?2-25? m;?50-100? m;高流速：; 如何将HPLC 方法转化为LC-ESIMS;6、 柱后修饰 作用： 调节pH值以优化正负离子检测； 　　　　　 添加异丙醇以利于含水溶剂的去溶剂化、稀释缓冲盐； 添加醋酸钠（50?mol/L)使缺乏或只有弱质子化位点的样品阳离子化(Ｍ＋Ｎa+) 填充毛细管柱色谱或毛细管电泳，需在柱后添加适当溶剂（补足液流）以达到稳定的喷 雾，以提高质谱响应。 装置： 三通、输液泵;LC-API MS中的质谱技术;2 、喷雾针的位置和去溶剂方法;3 、大气压离子源与真空的连接-自由喷射膨胀;4、簇离子问题 产生：APIMS 与LC、CE 等联用时，在离子源中有溶剂与水蒸气，由于自由喷射膨胀