LI6400-40荧光叶室讲解.pptVIP

* Fv/Fm : 胁迫！ Treatment. * 耐胁迫 qN qP都高的！ * 仪器开机后，测量光就一直开启着，对于暗适应的叶片，夹入叶室后，在其他光源均未开启的状态下，测得的即为叶片暗适应状态下的最低荧光F0，打一个饱和闪光之后测得的是在暗适应下的最大荧光Fm；完成暗适应的测定。 光适应下，除了测量光之外，活化光（或者做用光actinic）也要在夹光适应叶片前打开，夹入叶片后，在有作用光存在下，测得的第一个参数是光下的稳态荧光Fs，测定之后，打一个饱和闪光之后测得的是在光适应下的最大荧光Fm’；然后打一个暗脉冲，即中断做用光短暂一段时间，在此期间同时打开远红光，二者共同作用，测量光测得光适应下的最小荧光F0‘。完成光适应下的测定。 荧光叶室讲解 樊 敏 北京力高泰科技有限公司 基因有限公司 农业环境科学部 主要内容 叶绿素荧光现象 荧光基本原理 荧光测定的基本参数与意义 叶绿素荧光的应用范围 LI-6400-40荧光叶室操作介绍 叶绿体吸收光后，激发了捕光色素蛋白复合体（LHC），LHC将其能量传递到光系统2或光系统1。其间所吸收的光能有所损失，大约3%-9%的所吸收的光能被重新发射出来，其波长较长,也即叶绿素荧光 . 叶绿素荧光现象 基本原理 荧光发射的基本原理能量平衡原理——荧光强度的测定与计算电子传递链——荧光与光合的结合 荧光发射的基本原理 植物叶片所吸收的光的能量有三个走向： 光合驱动、热能、叶绿素荧光。 即当一个叶绿素分子a的电子吸收光能（有效光为红光和蓝光）后，跃迁到第一激发态和第二激发态。从激发态1回到基态的去激化过程中，一小部分激发能（3-9%）耗散为红色的荧光。 光合驱动、热能、叶绿素荧光三个主要过程之间存在竞争，其中任何一个效率的增加都将造成另外两个产量的下降。因此，测量叶绿素荧光产量，我们可以获得光化学过程与热耗散的效率的变化信息。荧光光谱不同于吸收光谱，其波长更长，因此荧光测量可以通过把叶片经过给定波长的光线的照射，同时测量发射光中波长较长的部分光线的量来实现。 能量平衡原理——荧光强度的测定与计算 活体叶绿素荧光是光合作用的有效探针Papageorgiou Govindjee, 2004 活体状态下，叶绿素荧光几乎全部来源于PSII的Chla（包括天线Chla），活体叶绿素荧光提供的快速信息仅仅反映了PSII对激发能的利用和耗散情况。 光合作用过程的各个步骤密切偶联，因此任何一步的变化都会影响到PSII从而引起荧光变化，也就是说通过叶绿素荧光几乎可以探测所有光合作用过程的变化。 电子传递链——荧光与光合的结合 光合电子传递链（Z链） 远红光 开放的反应中心和关闭的反应中心 “关闭” RC：当反应中心的电子受体质体醌（QA）接受电子，全部处于还原状态时，不能再接受电子，我们称之为关闭的RC。 “开放” RC：如果QA的电子传出，RC的电子可以完全传递给QA，则此时RC称为开放的RC。 荧光测定的基本参数与意义 F0 F0’ FV FV’ F0：暗适应叶片的最小荧光； FM：暗适应叶片的最大荧光； FM’：照光下的最大荧光； F0’：照光下的最小荧光； FV：最大可变荧光； FV’：照光下最大可变荧光； F(t)：照光过程中的荧光。 6400-40荧光测量过程及部分测量参数意义 参数 生物学意义 FV/FM 光系统2原初光化学反应的最大光化学效率 qP 光化学淬灭，反映了光系统2的初级电子受体QA的还原状态，或称开放的PSII中心的比例； qN 非光化学淬灭，反映了与类囊体膜能量化相关的耗散热能变化 ; NPQ 反映了与类囊体膜能量化相关的耗散热能变化 ; ETR 有效电子传递速率。 F0：最小初始荧光，又称基底荧光或暗荧光。指经过充分暗适应的光合机构光系统II（PSII）反应中心全部开放时的叶绿素（Chl）荧光发射强度。 Fm：最大荧光。指经过充分暗适应的光合机构PSII反应中心完全关闭时的Chl荧光发射强度。 F0`：光下最小荧光。在光适应状态下PSII反应中心完全开放时的Chl荧光发射强度。为了使照光后所有的PSII反应中心迅速达到最大开放程度，在测定前先用远红光进行照射。 Fm`：光下最大荧光。在光适应状态下PSII反应中心完全关闭时的荧光发射强度。 Fs：稳态荧光。又称Ft。 Fv/Fm：光化学量子效率，指没有遭受任何环境胁迫并经过充分暗适应叶片，其PSII最大的（潜在）光化学量子效率。一般植物恒定在0.75 ~ 0.85。 也被称为开放的PSII反应中心的能量捕获效率。 Fv / Fm = （Fm – F0）/Fm Fv`/Fm`：光下开放的PSII反应中心的激发能捕获效率。 Fv`/Fm` =（Fm