DNA和RNA提取原理和方法课件.ppt

DNA和RNA提取原理和方法;第一部分：DNA提取方法简介;　　　核酸是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要对象，因此核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作 。 ;第一部分：DNA提取方法简介;DNA提取的几种方法;DNA提取的几种方法;基因组DNA－ CTAB法;　CTAB提取缓冲液的经典配方;褐变;　CTAB提取缓冲液的改进配方;PVP（聚乙烯吡咯烷酮）;　CTAB法流程图; SDS法原理;; SDS法流程图 （以动物组织为例） ;基因组DNA－其它方法;基因组DNA－其它方法;基因组DNA－其它方法;质粒DNA－碱裂解法;质粒DNA－碱裂解法;SDS碱裂解法提取质粒DNA中溶液1的成分及作用 ;质粒DNA－煮沸法;细胞器DNA－差速离心法;第一部分：DNA提取方法简介;DNA提取的基本步骤;材料准备;严谨性质粒和松弛性质粒;细胞裂解;核酸分离、纯化;核酸分离、纯化;多糖的去除： 高盐法：用乙醇沉淀时，在待沉淀溶液中加入1/2体积的5M NaCl，高盐可溶解多糖。 用多糖水解酶将多糖降解。 在提取缓冲液中加一定量的氯苯(1/2体积)，氯苯可以与多糖的羟基作用，从而去除多糖 。 用PEG8000代替乙醇沉淀DNA：在500μL DNA液中加入200μl 20% PEG8000 (含1.2 M NaCl) ，冰浴20min。;多酚的去除： 在抽提液中加入防止酚类氧化的试剂：β-巯基乙醇、抗坏血酸、半胱氨酸、二硫苏糖醇等 加入易与酚类结合的试剂：如PVP、PEG(聚乙二醇)，它们与酚类有较强的亲和力，可防止酚类与DNA的结合;核酸沉淀、溶解; ; ; ;猕猴桃DNA提取实例;猕猴桃基因组DNA;第一部分：DNA提取方法简介;RNA提取的通用方法;　异硫氰酸胍/苯酚法;影响RNA提取的因素;影响RNA提取的因素;;第一部分：DNA提取方法简介;RNA提取常见问题; ; ; ; ; ; ;RT常见问题分析和解决方案;RT常见问题分析和解决方案;RT常见问题分析和解决方案;