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实验二 细胞的减数分裂 一、实验目的 了解生殖细胞减数分裂标本的制备过程,掌握生殖细胞减数分裂过程及各期的特点。二、实验原理和材料 见教材P30 三、实验方法 在动物中,雄蝗虫的精巢是观察减数分裂的好材料。蝗虫属于昆虫纲,直翅目,其染色体数是雄虫2n=23,XO; 雌虫2n =24,XX 。染色体大、数目少、易于观察。在繁殖季节,雄蝗虫精巢中处于减数分裂各个时期的细胞相当多,用精巢观察减数分裂过程是相当方便的。制片主要步骤如下。 1. 取材 捕捉雄蝗虫。蝗虫的雌雄可以通过外生殖器的结构识别。用剪刀剪去双翅,再由腹侧第13节剪一道口子将看到黄色的团块那即是一对精巢。这对精巢紧紧地贴在一起,外被薄膜,中央微凹,薄膜上含有大量的脂肪,所以整个精巢呈黄色(见下图)。 2. 固定 将精巢投入卡诺固定液中 , 室温下固定 2~6 小时 ,可以换固定液,至精巢发白。 再转入 70% 的乙醇中,存放在冰箱里备用。 3.制片及镜检 在载玻片上滴一滴染料 , 挑取 1~2条曲细精管或称精细小管置于其中 , 用解剖针将小管撕破并挤出其中的内容物或用刀片横切成几小段, 染色10至15分钟,压片后镜检。 四、结果观察 各分裂时期的特征 前期I 细线期:染色体呈很细的染色线,螺旋卷曲分散在细胞核内,沿着整条染色线分布着许多染色粒,形似念珠。在细胞核内,核仁清晰可见。 偶线期:同源染色体彼此接近,发生联会。在细线期末,偶线期初,染色体或染色丝在细胞中的部位发生变化。在植物细胞中,染色丝凝集成团,偏于细胞核的一边,称为凝线期,在这一时期,还出现染色质(丝)穿壁转移运动。在动物细胞中,染色丝的一端聚集到核的一侧,而另一端呈放射状扩散,呈花束状,特称花束期。凝线期或花束期一直延续到偶线期结束粗线期开始为止。 粗线期:同源染色体完成配对,成为二价染色体(或成对的同源染色体),染色体由于螺旋卷曲的结果而缩得很短,每一粗线期的染色体具有两条并列的染色单体,成对的同源染色体含有四条染色单体,称为四分体,核仁附着于特定的染色体上。 双线期:同源染色体之间彼此开始分离,但是在一个或多个点上互相交叉而又保持在一起,形似麻花。在该期,同源染色体的两个染色单体之间发生交换。 终变期:染色体缩得更短,交叉移向染色体的中间或末端,呈现V型、8型、O型或x型。染色体常移到核的周围靠近核膜的地方,是统计染色体的最好时期。该期结束时,伴随着核膜的破裂和核仁的消失。 中期I 核膜和核仁已消失,染色体排列在赤道面上,两极出现纺锤体并与染色体的着丝点相连。(此时所有染色体都排列在纺锤体的中部,但并不发生着丝点的分裂现象,与有丝分裂不同)。 后期I 两个同源染色体,由于着丝粒的作用而彼此分离,逐渐向两极移动,形成两组染色体。 末期I 当两组染色体移动到两极后又聚集起来,核膜重新出现。 中间期 当减数第一次分裂后,两个子细胞(或核)经过一个很短的间期(即中间期),便进入减数第二次分裂。随着物种的不同,中间期的长短不一,有些物种的细胞完全没有中间期。 前期II~末期II 分裂情况与有丝分裂相同. 在动物中,减数分裂结束时,一个精母细胞成为四个精细胞,每个精子细胞经过―系列的分化,转变成为精子。 五、作业(当场上交) 绘制2-4个分裂相的图,并加以说明 * * a剪去翅膀的雄蝗虫 b精巢 C雄蝗虫外生殖器的特征 (捕捉蝗虫注意各地的时间) c b a
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