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关于家禽化验室常用的资料 、设备：层吸定性滤纸、打孔器、平皿、密封小瓶、眼科镊、生理 盐水、天平、烧杯、待检药品（原粉或成药） 2 、操作步骤 2 ．1 用打孔器在层吸式定性试纸上打 6 毫米直径的滤纸片备用。 2 ．2 备检药品的药液配制： 一般按备检药品稀释倍数的 20 倍到 60 倍， 但注意的是所以各公司的药品须按同一倍数的稀释液制取药敏片。 例：先特锋每 100 克标准兑水量为 400 斤，即每 1 克加水 4 斤（2000ml ）， 按 60 倍量制药敏片即 1 克先特锋粉加生理盐水 2000/60=30ml 。 将药品分别放入不同的锥形瓶中加定量蒸馏水稀释溶解， 用纸把瓶口封 好，并对每一种药品在瓶签做好标记备用。 2 ．3 将滤纸片浸泡于药液中半小时以上，然后把药敏片放入恒温干燥 箱中 37--45 ℃干燥 2-3 小时后置于密封瓶中。（温度不易超过 60 ℃， 否则会有部分药物受热分解或变性，导致变色反应等） 2 ．4 药敏片的保存：密封瓶中放在冰箱中冷藏可保存半年。 实验二、 药敏实验 实验目的：抗菌药物敏感性试验，简称药敏试验，是指对敏感性不能预 测的分离菌株进行试验，测试抗菌药在体外对病原微生物有无抑制作 用， 以指导选择治疗药物和了解区域内常见病原菌耐药性变迁，有助于 经验性治疗选药。 操作步骤： 1、 将麦康凯琼脂粉称取 4.5-5g 放入三解瓶中，再加入 100 毫升蒸馏 水，封口备用。 2 、 取另一三角瓶放入加入 4.5-5g 营养琼脂粉 100 毫升蒸馏水，操作 同上。 3 、 将上述三角瓶分别做好标记后放入高压灭菌锅中 1.5 个大气压 10 分钟高压灭菌。（注意按高压灭菌锅的操作规定，注意安全） 4 、 待高压蒸汽灭菌锅指示归零后， 取出琼脂和麦康凯分别倒入准备好 的培养皿中，稍稍凉后即可盖上平皿盖，分别标记后备用。 （注意平皿 必须是经过清洗并干燥灭菌；倾注平板时，厚度应合适约 5-6mm ，不 可太薄或太厚） 5 、 接种：用经过灭菌的接种环挑取肝脏组织以划线方式接种。或用盐 水浸泡一下肝脏或心脏组织，用棉拭子沾取其溶液轻涂于培养基表面。 6 、 用灭菌尖头镊子，取已经制备好的药敏片分别贴于培养基表现，梅 花形排列。用镊子轻按一下药敏纸片， 并在平板底部相应的位置上做出 不同药敏片相对应的标记。 7 、 将上述平皿置于 37 ℃恒温箱中悬挂培养 24 小时。观察结果。 8 、 观察记录结果。 以药敏纸片周围没有肉眼可见生长物区域为抑菌圈， 根据抑菌圈直径大小判断细菌对抗菌药的敏感性。 药敏试验结果判定标准 抑菌圈直径（毫米）敏感性 ＞20 极敏感 15-20 高敏感 10-14 中敏感 ＜10 低敏感 0 不敏感 实践证明，利用自制药敏纸片进行药敏试验，可以灵活选药，与某病菌 相关的药物均可随时制作药敏纸片用于治疗。 可在本场药品范围内或本 地区容易买到的药品中选出最敏感的药物。 还可在短时间内选择最佳药 品和最佳剂量，既能缩短病程，又能避免盲目用药，减少浪费。 实验三、 革兰氏染色（与药敏试验相结合） 实验目的：学习和掌握显微镜的使用，染色片的制备和染色。 实验材料：结晶紫染色液、碘液、 95% 酒精、番红 显微镜、载玻片、盖玻片、生理盐水、滤纸、酒精灯、接种环、结晶紫、 碘液、 95% 的酒精沙黄。 试验方法：将病菌落接到载玻片然后染色在显微镜下镜观察菌落