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第十章 核酸的酶促降解 和核苷酸代谢 ;核酸酶实质是磷酸二脂酶。
根据酶对底物的专一性分为:核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶、非特异性核酸酶。
根据酶的作用方式分:内切酶、外切酶。;一、核糖核酸酶;只能水解DNA磷酸二酯键的酶。
牛胰脱氧核糖核酸酶(DNaseⅠ),可切割双链和单链DNA,降解产物为3’-磷酸为末端的寡核苷酸。
限制性核酸内切酶:细菌体内能识别并水解外源双链DNA的核酸内切酶,可特异切割外源DNA特定序列中的磷酸二脂键(对碱基序列专一),切断双键,常作为工具酶。?
;限制性内切酶类型;产生3ˊ-OH和5ˊ-P的末端;限制性内切酶的命名和意义;;既可水解RNA,又可水解DNA磷酸二酯键的核酸酶。
小球菌核酸酶(内切酶),可作用于RNA或变性的DNA,产生3’-核苷酸或寡核苷酸。
蛇毒磷酸二酯酶和牛脾磷酸二酯酶(外切酶)。;蛇毒磷酸二酯酶能从RNA或DNA链的游离的3’-OH逐个水解,生成5’-核苷酸。
牛脾磷酸二酯酶从游离的5’-OH开始逐个水解,生成3’核苷酸。 ;第二节 核苷酸的生物降解;一、核苷酸的降解;2、核苷磷酸化酶;
不同生物降解的产物不同
;(人类和灵长类动物);尿囊酸酶;三、嘧啶的降解;一、嘌呤核苷酸的生物合成; (1)嘌呤环上各原子的来源;IMP的合成是从5-磷酸核糖开始的,先于ATP反应生成5’-磷酸核糖-1’-焦磷酸(PRPP),然后嘌呤环的各原子在PRPP的C-1位置上逐渐加上去。;5-P核糖;
5-磷酸核糖 + CO2 + 甲川THFA + 甲酰THFA + 2Gln + Gly + Asp + 5ATP →
IMP + 2THFA + 2Glu + 延胡索酸 + 4ADP + 1AMP + 4Pi + PPi;(3)IMP转变为GMP和AMP;嘌呤核苷 + 磷酸;腺嘌呤在核苷磷酸化酶作用下转化为腺嘌呤核苷,后者在腺苷激酶的作用下与ATP反应,生成腺嘌呤核苷酸。 ;与嘌呤核苷酸合成不同,在合成嘧啶核苷酸时,首先合成嘧啶环,再与磷酸核糖结合,生成尿嘧啶核苷酸,最后由尿嘧啶核苷酸转化为胞嘧啶核苷酸。;(1)嘧啶环上各原子的来源 ;(2)尿嘧啶核苷酸的合成;尿嘧啶核苷三磷酸可直接与NH3(细菌)或Gln(动物)反应,生成胞嘧啶核苷三磷酸。;嘧啶碱与1-磷酸核糖生成嘧啶核苷,然后由尿苷激酶催化尿苷和胞苷形成UMP和CMP。 ;脱氧核糖核苷酸是由相应???核糖核苷酸衍生而来的。
;(1)核糖核苷酸的还原反应;由尿嘧啶脱氧核苷酸(dUMP)经甲基化生成。Ser提供甲基,NADPH提供还原当量。 ;胸腺嘧啶核苷酸合成酶;四氢叶酸是一碳的载体,参与嘌呤核苷酸和胸腺嘧啶脱氧核苷酸的合成。
氨基蝶呤、氨甲蝶呤是叶酸的类似物,能与二氢叶酸还原酶不可逆结合,阻止FH4的生成,从而抑制FH4参与的一碳单位的转移。可用于抗肿瘤。 ;三、? 核苷酸合成总结;一、名词解释
酰氨平面、别构效应、结构域、
主动运输、辅基、Tm
二、简答
1、简述蛋白质含量测定的3种方法及原理
2、比较蛋白质α-螺旋中的氢键和DNA双螺旋中的氢键,并指出氢键在稳定这两种结构中的作用。
3、 DNA双螺旋一条链序列是GGATCGAAC,请写出其互补链序列。
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