RNA复制子疫苗——读书报告.pptVIP

RNA复制子疫苗 RNA复制子疫苗 产生背景 作用原理 主要载体 基本特点 RNA复制子疫苗的产生背景 减毒苗或灭活苗:有比较高的危险性 基因工程疫苗：不具感染力，激活免疫的能力差。 DNA疫苗：①外源DNA与宿主细胞基因组发生整合，造成恶性转变的潜在危险；②由于需要长时间低水平表达外来抗原，有诱发自身免疫反应的可能，如诱发DNA抗体；③在灵长类动物体内实验结果并不很理想，所需剂量大，免疫原性低。 作用原理 RNA复制子载体包含病毒基因组5’和3’末端的非编码区、非结构蛋白基因编码区(编码复制酶的基因)及被外源基因取代的结构蛋白基因编码区，而这个外源基因是可由亚基因组mRNA启动子控制表达。 表达抗原的RNA复制子可以3种形式递送至体内：①构建成质粒DNA，注入体细胞，由细胞RNA聚合酶Ⅱ体内转录成复制子RNA；②将RNA复子载体进行体外转录，得到裸RNA，再将其注入体细胞；③将复制子RNA包装入病毒样颗粒 作用原理 RNA复制子在宿主细胞中利用细胞内的表达系统表达RNA复制酶，RNA复制酶可使RNA复制子高效地复制，并在细胞内产生大量外源抗原基因的mRNA，使外源抗原基因得到高效表达，以诱导细胞免疫和体液免疫应答。 同时RNA复制子的大量复制可导致感染细胞的凋亡，宿主细胞的凋亡有利于免疫系统识别外源抗原。 RNA复制子载体 RNA复制子载体:披膜病毒科的甲病毒、黄病毒、小RNA病毒、杯状病毒及副粘病毒等 涉及的对象:病毒、肿瘤及细菌毒素等 RNA复制子疫苗特点 优点：抗原表达效率高；安全性好；免疫效果好； 用途广 缺点：稳定性差；可能会引起宿主周围细胞凋亡，大 量细胞凋亡可能造成炎症反应。 参考文献 RNA复制子疫苗研究进展； 作者：杨冬 欧阳松应， 王云龙 欧阳红生 抗原表达效率高 RNA复制酶使得RNA得到高水平复制，同时抗原基因也得到高效表达。理论上，在单细胞中4 h内有近2×105拷贝的RNA产生，抗原的表达可达总细胞蛋白的25％，因此其用量远远低于常规DNA质粒就能诱导很强的免疫应答。有报道显示，纳克水平的自主复制基因疫苗就能引发有效的抗体和CTL细胞反应。 安全性好 RNA复制子疫苗的表达短暂，且不会造成转化。RNA复制于细胞浆内，排除了核的参与，而且由于宿主细胞缺乏内源性的反转录酶，不可能反转录为DNA整合到宿主基因组。另外，RNA复制子导致转染细胞的溶解，避免了有复制能力病毒的产生。因此，RNA复制子疫苗在安全性方面拥有普通DNA疫苗无可比拟的优越性。 免疫效果好 RNA复制子疫苗可同时诱导全身免疫和黏膜免疫、抗体应答和CTL反应；另外，复制子系统能自主复制，但不能自行包装为感染性病毒颗粒，可针对多种病原进行连续免疫，而不受已有载体病毒抗体的干扰。 用途广 RNA复制子疫苗可用于防治传染病、肿瘤等多种疾病 稳定性差 裸RNA容易降解，不易保存和运输。如果将RNA包装成病毒样颗粒，或利用其他方法(如脂质体)将RNA包裹起来可提高其稳定性。 自主复制的RNA疫苗可能会引起宿主周围细胞凋亡，大量细胞凋亡可能造成炎症反应。 * *