生物化学——第二章核酸.pptVIP

1928年，英国 Griffith S型肺炎球菌：有荚膜，菌落表面光滑 R型肺炎球菌：没有荚膜，菌落表面粗糙 结果说明：加热杀死的S型肺炎球菌中一定有某种特殊的生物分子或遗传物质，可以使无害的R型肺炎球菌转化为有害的S型肺炎球菌。 这种生物分子或遗传物质是什么呢？ mRNA：(messengerRNA) 信使RNA 已经发现的RNA种类 RNA在蛋白质合成中的作用 1、戊糖 2、碱基 稀有碱基（微量碱基、修饰碱基） 嘌呤——次黄嘌呤、1-甲基次黄嘌呤、N2、N2-二甲基鸟嘌呤。 嘧啶——5-甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶、二氢尿嘧啶、4-硫尿嘧啶 都是基本碱基的化学修饰型。 tRNA中含有较多的稀有碱基 3、核苷与核苷酸 核苷酸 八种核苷酸如下表所示 M— 单 (D— 二、T— 三 ） ；P—磷酸 RNA的名称为某（二、三）苷酸，DNA在某（二、三）前加脱氧两字。如AMP称腺苷—磷酸(或腺苷酸），dAMP称为脱氧腺苷—磷酸（脱氧腺苷酸）。 稀有核苷酸与上类似 (3) 肌苷酸及鸟苷酸(强力味精) 5、核苷酸的生物学作用 参与核酸、蛋白质、糖与磷脂的合成； 在能量转化中起重要作用； 是构成多种辅酶的成分； 参与细胞中的代谢与调节 核酸一级结构的简写形式 线条式缩写 大部分DNA所具有的双螺旋结构，亦称为B 型 碱基间的氢键 双螺旋结构的稳定因素： 问题：起稳定作用的有哪些力呢？ 在真核及原核细胞皆有证 据显示短的Z 型DNA在。 真核细胞染色体的DNA念珠状三级结构 染色体的基本单位是核小体； 核小体由DNA和组蛋白构成。 组蛋白H2A，H2B，H3和H4各两分子构成组蛋白八聚体，DNA双螺旋分子缠绕其上1.75圈（146bp）----核小体的核心颗粒。 核小体的核心颗粒之间由DNA和组蛋白H1连接 第三节 RNA分子的结构 1、tRNA的结构 tRNA的三叶草型二级结构 环：8-12个核苷酸 臂：3-4bp tRNA的三级结构——倒L型 2、mRNA的结构 3、rRNA的结构 第四节 核酸的性质 二、核酸的紫外吸收 三、核酸的水解 1、酸碱水解 酸解：嘌呤糖苷键嘧啶糖苷键 磷酸酯键； （从易 难） 碱解：RNA稀碱条件下降解，而DNA则不被降解；DNA比RNA耐碱。 根据底物分：DNase和RNase 根据作用方式分：核酸外切酶和核酸内切酶。 核酸外切酶：从多聚核苷酸链的3’-端或5’-端开始，逐个水解切除核苷酸； 核酸内切酶：从多聚核苷酸链中间某个位点开始切断磷酸二酯键。其中限制性核酸内切酶特异性地水解核酸中某些特定碱基顺序部位。 四、核酸的变性、复性及杂交 DNA的变性过程 2、变性重要特征——判断变性的标志 3、DNA的热变性 影响Tm值的因素 : 4、复性 核酸的复性 5、核酸的分子杂交(hybridization) 一、一般性质： 1、两性电解质：通常偏酸 2、性状：DNA白色纤维状固体，RNA为白色粉末。 3、溶解度：微溶于水，不溶于一般的有机溶剂。 4、分子性状：DNA大多为线性分子，不对称。 5、粘度：DNA溶液粘度极大，RNA溶液粘度要小的得多。 6、含磷量——恒定 ：RNA为9.4%、DNA为9.9 % 7、颜色反应 1) D核糖 + 浓HCl + 苔黑酚（甲基间苯二酚）共热产生绿色，测定RNA。 2) D-2-脱氧核糖+酸+二苯胺共热产生蓝紫色，测定DNA。 在核酸分子中，由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键体系，因而具有独特的紫外线吸收光谱，一般在260 nm左右有最大吸收峰，可以作为核酸及其组份定性和定量测定的依据。 天然核酸紫外吸收值小于各成分核苷酸光吸收之和（为什么？） 是有规律的双螺旋结构中碱基紧密地堆积在一起造成的。 2、核酸的酶解 核酸水解酶：催化水解多聚核苷酸链中的磷酸二酯键。 1、变性（denaturation）：高温、酸、碱及某些变性剂（如尿素）能破坏核酸中的氢键，使有规律的螺旋型结构变成单链的、无规律的“线团”，此作用称为核酸的变性。 蛋白质： 高级结构 松散肽链 变性 （变性不涉及肽键） 核酸： 螺旋结构 无规则线团 变性 （变性不涉及磷酸二脂键的断裂 ） 加热 部分双螺旋解开 无规则线团 链内碱基配对 紫外吸收值急剧增加——增色效应 粘度下降，比旋下降 生物活性丧失 结构松散，容易被酶解 核酸变性的因素: 温度升高、酸碱度改变、甲醛和尿素等的存在均可引起核酸的变性。 DNA的变性过程是突变性的，它在很窄的温度区间内完成。因此