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常见化学发光体系简述 连海燕 2015-11-25 目录 化学发光免疫分析基本原理 常见的化学发光体系 化学发光免疫分析法分类 常用进口发光免疫分析产品 化学发光免疫分析基本原理 化学发光免疫分析含有免疫分析和化学发光分析2个系统 免疫分析系统是将化学发光物质或酶作为标记物,直接标记在抗原或抗体上,经过抗原与抗体反应形成抗原-抗体免疫复合物。 化学发光分析系统是在免疫反应结束后,加入氧化剂或酶的发光底物,化学发光物质经氧化剂的氧化后,形成一个处于激发态的中间体,会发射光子释放能量以回到稳定基态,发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测，根据化学发光标记物与发光强度的关系,可利用标准曲线计算出被测物的含量。 常见的化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience 鲁米诺化学发光体系 ☆ 鲁米诺（luminol）、异鲁米诺（isoluminol）及其衍生物的发光为氧化反应发光，它们在碱性条件下通过辣根过氧化物酶（HRP）催化，被H2O2氧化生成3-氨基邻苯二酸的激发态中间体，当其回到基态时发出光子。 常见的化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience 鲁米诺化学发光体系 鲁米诺及其衍生物的增敏化学发光机制 常见的化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience 吖啶酯化学发光体系 ☆ 光泽精是第一个被发现有化学发光性质的吖啶类化合物，也是应用最广泛的一种吖啶酯类发光试剂。 ☆ 吖啶类化合物的发光效率高，量子产率可达0.05，作为标记物用于免疫分析，其发光体系简单、快速，不需要加入催化剂，也不需要增强剂，从而降低了背景发光，提高了信噪比，干扰作用少。 常见的化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience 吖啶酯化学发光体系 吖啶酯化学发光机制 常见的化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience AMPPD化学发光体系 ☆ （金刚烷）-1,2-二氧环乙烷及其衍生物的发光体系是目前最重要、最灵敏的一类发光体系，主要代表：ALP-AMPPD发光体系。 ☆ 该体系中溶液的pH增高会增强发光强度,实验证明最佳pH为9.0，在该体系中加入水溶性的大分子物质牛血清白蛋白(BSA)或十四烷酰氨基荧光素与十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)构成的水溶性胶粒,可使发光强度增强400倍。 常见的化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience AMPPD化学发光体系 ☆ 3-（2-螺旋金刚烷）-4-（3-磷氧酰）苯基-1,2-二氧环乙烷（AMPPD）。 ☆ AMPPD是一种超敏感的AP底物,它首先在AP的特异催化下迅速脱磷酸基生成AMPD-阴离子中间体(半衰期2～30 min), 此不稳定的中间体经分子内电子转移裂解为一分子的金钢烷酮和一分子处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子，当回到基态时发出发出λ max为477 nm的光，并可持续几十分钟。 常见的化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience AMPPD化学发光体系 AMPPD及其衍生物化学发光机制 常见的化学发光体系 welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience 电化学发光体系 ☆ 电化学发光的反应在电极表面进行,发光底物为三联吡啶钌[Ru(byp) 32+],三丙胺(TPA)用来激发光反应 ☆ 在阳极表面,两种物质同时失去电子。在电极板上Ru(byp)32+被氧化成Ru(byp)33+ TPA也被氧化成阳离子自由(TPA+*), TPA+*自发地释放一个质子而变成非稳定分子(TPA*), 将一个电子递Ru(byp)33+, 形成激发态